高尿酸血症通过调控肾上皮钠通道(ENaC)介导高血压发生的机制研究-病理学与病理生理学专业论文.docxVIP

南京医科大学博士学位论文分类号： 南京医科大学博士学位论文 分类号： 单位代码： 10312 密级： 学 号：南京医科大学 博士学位论文 题 研究生： 徐卫锋 指导教师： 梁秀彬教授 学科专业： 病理学与病理生理学 学院名称： 基础医学院 完成时间： 二O一五年五月 万方数据 南京医科大学博士学位论文南京医科大学 南京医科大学博士学位论文 南京医科大学 学位论文原创性声明 本人郑重声明：所呈交的论文是本人在导师的指导下，独立进行研究工作 所取得的成果。除了文中特别加以标注引用的内容外，本论文不包含任何其他 个人或集体已经发表或撰写的成果作品。对本文的研究做出重要贡献的个人和 集体，均己在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律后果由本人 承担。 作者签名：7肆移卢气 日期：弘下年6月-『日 导师签名： 日期：少旷年‘月I『日 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校 保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和 借阅。本人授权南京医科大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数 据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。 本学位论文属于(请务必在以下相应方框内打“√”)： I、保密0，在一年解密后适用本授权书。 2、不保密口。 作者签名：拂莎磁 日期：矽＼y年e月，1日 别磁名捌 日期：加严∥月／，日 万方数据 南京医科大学博士学位论文目录 南京医科大学博士学位论文 目录 中文摘要 1 Abstract．． ． ． ．． ． ． ． ． ． ． ． ． ．． ．． ． ．． ． ． ．．．3 第一部分：高尿酸血症诱导大鼠高血压和肾脏损伤的发生 6 前月U 言舌 66 材料与方法 ．．10 结 果 ．1 8 分析与讨论 ．26 结论与展望 ．29 第二部分：高尿酸血症上调肾脏集合管上皮细胞ENaC的表达诱导大鼠高血压的 发生 ．．30 前翮 言舌 ．30．30 材料与方法 ．34 结 果 ．41 分析与讨论 ．49 结论与展望 ．53 第三部分：高尿酸血症上调肾脏集合管上皮细胞ENaC的机制研究 ．54 前日0 言舌 ．54．54 材料与方法 ．57 结 果 ．63 分析与讨论 ．67 参考文献 ．70 结论与展望 ．84 综述：高尿酸相关的高血压与ENaC的关系 ．85 英文缩略词表 11 1 攻读学位期间发表文章 113 致 谢 ．114 万方数据 南京医科大学博士学位论文高尿酸血症通过调控肾上皮钠通道(ENaC)介导高血压发生 南京医科大学博士学位论文 高尿酸血症通过调控肾上皮钠通道(ENaC)介导高血压发生 的机制研究 中文摘要 目的 肾脏通过调节远曲小管以及集合管上皮细胞膜上的钠离子通道(ENaC)调 节人体内的水、钠平衡，维持机体的血压稳定。肾小管上皮细胞ENaC的过度激 活是多种类型高血压发病的重要因素之一。大量流行病学及临床资料证明，高 尿酸血症与高血压，尤其是盐敏感性高血压的发生发展密切相关，但是二者之 间内在的联系至今尚未阐明。本研究的目的是探讨高尿酸血症引起盐敏感性高 血压的过程中，对肾脏上皮钠离子通道表达的影响及其相关机制。 方法 大鼠被随机分成4组每组(5只)：对照组(Con)；氧嗪酸组(OA)：2％OA 的饮食和饮水中加入6mg／dl的尿酸；苯溴马隆组(OA+Ben)：OA处理联合饮水 中加入10mg／kg／d的苯溴马隆；阿米洛利组(OA+Ami)：OA处理联合饮水中加 入lmg／kg／d的阿米洛利。第0，3，6周检测各组大鼠血尿酸(UA)、血尿素氮 (BUN)、血肌酐(Cr)、血醛固酮(ALO)、血Na+、K+、C1。及尿Na+、尿K+、尿 Na+／K+。第0，2，4，6周检测各组大鼠血压包括收缩压(SBP)、舒张压(DBP)及 脉率。第6周处死大鼠后检查肾脏形态学(HE染色和Masson染色)。免疫组化 及Western blot方法检测大鼠肾脏0L．、p．、丫．ENaC的表达。体外培养肾脏集合 管上皮细胞(mCCD)给予尿酸(0、1、3、6mg／d1)刺激48小时，Western blot方 法检测mCCD的c【．、B．、1,-ENaC表达；检测ENaC调节复合物(ERC)的成分 SGKl，GILZl，P．ERKl／2，ERKl／2的表达来揭示尿酸对ENaC调控的分子机制。 使用Ussing chamber电生理检测尿酸(6mg／d1)处理mCCD细胞24小时后的 ENaC介导的短路电流(Isc)的影响。 万方数据 南京医科大学博士学位论文结果 南京医科大学博士学位论文 结果 与Con组比较，第6周OA组大鼠的SBP、DBP、血UA、BU