生物的技术制药.docVIP

实用标准文案 精彩文档 生物技术制药：采用现代生物技术可以人为的创造一些条件，借助某些微生物、植物、或动物来生产所需的医药品，称为生物技术制药。 生物技术：广义的角度来说是人类对生物资源（包括微生物、植物、动物）的利用、改造并为人类服务的技术。 基因工程是核心和关键；酶工程是条件；发酵工程是获得终产物手段；细胞工程是基础。 第二代基因工程:蛋白质工程 第三代基因工程：海洋生物技术。 现在生物药物的四大类型： ①应用重组dna技术生产的基因重组多肽，蛋白质类药物 ②基因药物，基因疫苗基因治疗剂 ③天然生物药物 ④合成和部分合成的生物药物 生物技术药物: 采用DNA重组技术或其他生物技术研制的蛋白质或核酸类药物。 不能忘记的人： MendelMendel：遗传学分离规律和自由组合规律。 T H Morgan（1866-1945）：一是发现基因在染色体上，二是发现遗传的基因连锁和互换定律。 J D Watson F H C CrickJ Crick：DNA双螺旋结构。 桑格（英国化学家）最早测定胰岛素的氨基酸顺序获得1958年诺贝尔化奖。 吉尔伯特在DNA测序领域，因其卓越的工作获得1980年诺贝尔化学奖。 Paul Berg：重组DNA技术之父。 二、生物技术药物的特性： 分子结构复杂 具有种属特异性 治疗针对性强、疗效高 稳定性差 基因稳定性 免疫原性 体内的半衰期短 受体效应 多效性和网络效应 检验的特殊性 第三节、生物技术制药特点 ?高技术 ?高投入 ?长周期 ?高风险 ?高收益 第二章 基因工程药物生产的基本过程： 基因工程药物的生产分为上游和下游两个阶段： 上游阶段：主要是分离目的基因、构建工程菌(细胞)。 目的基因获得后，最主要的就是目的基因的表达。选择基因表达系统主要考虑的是保证表达的蛋白质的功能，其次是表达的量和分离纯化的难易。此阶段的工作主要在实验室内完成。 下游阶段：从工程菌的大量培养一直到产品的分离纯化和质量控制； 此阶段是将实验室的成果产业化、商品化，主要包括 –工程菌大规模发酵最佳参数的确立， –新型生物反应器的研制， –高效分离介质及装置的开发， –分离纯化的优化控制 –高纯度产品的制备技术， –生物传感器等一系列仪器仪表的设计和制造， –电子计算机的优化控制等。 克隆真核基因常用方法：反转录法和化学合成法。 宿主细胞的分类：①原核细胞，常用的有大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、链霉菌等； ②真核细胞，常用的有酵母、丝状真菌、哺乳动物细胞。 大肠杆菌：表达产物的形式：①细胞内不溶性表达（包含体）、②胞内可溶性表达、③细胞周质表达，④极少还可分泌到胞外表达。不同的表达形式具有不同的表达水平，且会带来完全不同的杂质。 特征： 多为胞内产物； 分泌能力不足，真核蛋白质常形成不溶性的包含体(inclusion body)。 不存在翻译后修饰作用。多余一个甲硫氨酸残基，容易引起免疫反应。 枯草芽孢杆菌：分泌能力强，可将蛋白质产物直接分泌到培养液中，不形成包含体。该菌也不能使蛋白质糖基化，另外由于它有很强的胞外蛋白酶，会对产物进行不同程度的降解，因此，它的应用也受到限制。 链霉菌：重要的工业微生物。特点是不致病、使用安全，分泌能力强，可将表达产物直接分泌到培养液中，具有糖基化能力，可做理想的受体菌。Why？？ 2、真核细胞（1）酵母：⑤繁殖迅速，可廉价的大规模培养，而且①没有毒性，②基因工程操作与原核生物相似，③表达产物直接分泌到细胞外，简化了分离纯化工艺;④表达产物能糖基化;特别是某些在细菌系统中表达不良的真核基因，在酵母中表达良好。目前以酿酒酵母应用最多。干扰素和乙肝表面抗原已获成功。 （2）丝状真菌： ?很强的蛋白质分泌能力； ?能正确进行翻译后加工，包括肽剪切和糖基化； ?而且糖基化方式与高等真核生物相似； ?丝状真菌（如曲霉）被确认是安全菌珠，有成熟的发酵和后处理工艺。 （3）哺乳动物细胞：由于外源基因的表达产物可由重组转化的细胞分泌到培养液中，培养液成分完全由人控制，从而使产物纯化变得容易。产物是糖基化的，接近或类似于天然产物。但动物细胞生产慢，生产率低，而且培养条件苛刻，费用高，培养液浓度较稀。 1、载体：表达载体必须具备的条件（1）载体能够独立的复制（需要复制起始点）；（2）具有灵活的克隆位点和方便的筛选标记。且克隆位点应在启动子序列后，以使克隆的外源基因得以表达；（3）具有很强的Promoter，能为大肠杆菌的RNA聚合酶所识别；（4）具有Repressor，使启动子受到控制，只有当诱导时才能进行转录；（5）具有很强的终止子，以便使RNA聚合酶集中力量转录克隆的外源基因，而不转录无关的基因。（6）所产生的mRNA必须具有翻译的起始信号，即起始密码AUG和SD序列，以便转录后能顺利翻译。 复制子：可以定义