SNAP-ta蛋白标记技术.pptVIP

SNAP-tag蛋白标记技术在生物学领域的的应用研究进展 生物物理学报 2014年6月 第30卷 第4期：251-263 背景 蛋白质是细胞的基本组成成分，是生命功能的体现者。研究蛋白质的结构、功能及其在细胞内的运动特征、相互作用和化学微环境等，对于了解细胞复杂的生命过程至关重要。 1.绿色荧光蛋白（green fluorescent protein, GFP）的发现及应用，是活细胞蛋白特异性标记方法发展的一个里程碑，它可以在不额外加入任何底物的情况下发出荧光，结合荧光成像技术可实现对活细胞内蛋白质的可视化监测。 缺点： GFP的荧光光谱较为单一，发光具有氧依赖性，且存在应答较为缓慢、灵敏度不高等。 2.SNAP-tag蛋白标记技术克服了以上缺点，具有较高的特异性、稳定性及配体的多样性，在蛋白标记等众多领域获得越来越广泛的应用。 SNAP-tag的设计原理 SNAP-tag蛋白中作为反应位点的半膀氨酸亲和进攻O6修饰的苯甲基鸟嘌呤的苄基，脱去鸟嘌呤结构后，半膀氨酸与苄基形成稳定的硫醚共价键，实现对靶蛋白的共价标记。 SNAP-tag的配体及功能 优点 SNAP-tag技术的应用 SNAP-tag在细胞内蛋白质性质与功能研究中的应用 1.蛋白质