cxcr12拮抗剂g31p在鼠特应性皮炎中抗炎作用的研究.docxVIP

优秀毕业论文 精品参考文献资料 目 目 录 一、摘要 ．1 (一)中文摘要 ．1 (二)英文摘要 ．4 二、正文 ．7 (一)前言 ．7 (二)材料和方法 ．8 1．材制． 8 1．1主要试剂 8 1．2实验仪器 9 1．3实验动物 一9 2．方：法 9 2．1小鼠模型的建立及标本收集 ．9 2．2小鼠皮肤组织HE染色 一1 0 2．3小鼠皮肤组织免疫组化 ．1 1 2．4 ELISA检测小鼠皮肤组织匀浆液中IL．4、IL．8水平 12 2．5 PCR检测小鼠皮肤组织炎症细胞因子 ，13 2．6 Western Blotting检N4,鼠皮肤组织蛋白表达 1 5 2．7小鼠皮肤组织MPO活性测定 ．16 2．8统计学分析 ．．】7 (三)结果 17 1．G31P减缓特应性皮炎小鼠皮损程度 】7 2．G31P对特应性皮炎小鼠的炎症反应有抑制作用 一17 3．G31P降低特应性皮炎小鼠皮肤组织中炎症细胞因子的表达 18 3．1 G31P降低特应性皮炎小鼠皮肤组织匀浆液中IL．4、IL．8表达 ．18 3．2 G31P降低特应性皮炎小鼠皮肤组织中炎症细胞因子mRNA表达水平 一19 4．G31P降低特应性皮炎皮损组织中转录因子NF—v．B的蛋白水平 22 5．G31P降低特应性皮炎小鼠皮损组织中GRO．c【的表达 ．24 6．G31P抑制特应性皮炎中的中性粒细胞浸润 25 (四)讨论 26 (五)结论 ．32 (六)参考文献 33 三、综述 36 (一)综述 -36 (二)参考文献 40 四、攻读学位期间发表文章情况 ．．42 五、致谢 ．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．，．．．．．．．．．．．．．．．43 万方数据 大连医科大学硕士学位论文一、摘要 大连医科大学硕士学位论文 一、摘要 (一)中文摘要 CXCRl／2拮抗剂631 P在小鼠特应性皮炎中抗炎作用的研究 硕士生姓名：兰元翎 指导教师：李芳教授 专业名称： 免疫学 目的：探讨特应性皮炎小鼠模型中CXCRl／2拮抗剂G3 1P的抗炎作用。 材料和方法： 1、动物分组及模型的建立：BALB／c小鼠60只随机分成特应性皮炎组(AD 组)、G31P治疗组和对照组，每组20只。根据Spergel[1]等外用卵清蛋白 (ovNbumin，OVA)致敏小鼠的方法，建立特应性皮炎动物模型，AD组和G3lP 治疗组用100 pl(1 pg／91)的卵清蛋白溶液腹部经皮致敏小鼠，每周3次，间隔两 周重复1次，步骤同第一周，共重复2次。对照组给予相同剂量的生理盐水。G31P 治疗组小鼠在每次致敏的前一天和致敏后第7天局部皮下注射20pl(O．25pg／p1) 的IL．8受体CXCRl／2拮抗剂G31P。 2、标本的采集：小鼠致敏结束24 h后，处死小鼠，取腹部致敏部位皮肤组织。 3、检测方法：(1)观察各组小鼠瘙痒情况及致敏处皮损情况。(2)HE染色法检 测各组小鼠皮肤组织病理学改变。(3)酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组小鼠致 敏局部皮肤组织匀浆液中炎症细胞因子IL．4、IL-8的水平。(4)PCR检测各组小鼠 皮肤组织炎症细胞因子(IL．4、IL一8、IL．6、IL．10)mRNA的水平。(5)Western Blot 和免疫组化检测各组小鼠皮肤组织转录因子NF．1cB的表达。(6)免疫组化法检测各 组小鼠皮肤组织GRO．Ⅱ的表达。(7)皮肤组织髓过氧化物酶(MPO)活性检测分析 各组小鼠皮肤组织中性粒细胞的浸润情况。 万方数据 大连医科大学硕上学位论文结果： 大连医科大学硕上学位论文 结果： l、通过对各组小鼠致敏及治疗过程中搔抓现象及皮损程度的观察：对照组小 鼠全程无明显的搔抓现象，致敏处皮肤光滑未出现明显病理改变；AD组小鼠会出 现频繁的搔抓现象，致敏处的皮肤出现红斑、结痂、脱屑等典型特应性皮炎外观 改变；G31P治疗组小鼠水肿及脱屑现象较AD组均有明显的减轻，提示G31P能 够明显抑制OVA诱导的特应性皮炎引起的小鼠局部皮损，具有调节改善特应性皮 炎的作用。 2、各组小鼠皮肤组织的HE染色结果显示，AD组小鼠皮肤表皮明显增厚， 真皮层有大量炎症细胞浸润，G31P治疗组的小鼠皮肤表皮轻微增厚，有少量炎症 细胞浸润，对照组小鼠皮肤组织未见炎症病理改变，提示G31P可能对特应性皮炎 的炎症反应有减轻或抑制作用。 3、各组小鼠皮肤组织匀浆液的ELISA结果显示，经G31P治疗后的小鼠皮肤 组织匀浆液中的炎症细胞因子IL一4、IL一8的表达(10．76±5．6，7．69±2．19，ng／L)显 著低于AD组(27．12-+-6．3，16．69-t-2．36，ng／L)(P0．01)，但明显