人精子过氧化氧化还原蛋白2表达与精子DNA损伤的相关性.PDF

·９４８ · 医学研究生学报 ２０１８年９月 第３１卷 第９期　 Ｊ Ｍｅｄ Ｐｏｓｔｇｒａ，Ｖｏｌ．３１，Ｎｏ．９，Ｓｅｐｔｅｍｂｅｒ，２０１８ 论　 　 著 （临床研究） 人精子过氧化氧化还原蛋白２表达与精子 ＤＮＡ 损伤的相关性 姚亮宇，靖　 俊 　 　 ［摘要］　 目的　 精子ＤＮＡ损伤的分子机制尚不明确。 文中旨在通过检测精子ＤＮＡ正常者和精子ＤＮＡ损伤患者过氧化 氧化还原蛋白２（Ｐｒｄｘ２）表达差异，分析Ｐｒｄｘ２ 表达与精子ＤＮＡ 损伤指数（ＤＦＩ）的相关性。 　 方法　 收集２０１７年７月至２０１８ 年７月南京军区南京总医院生殖医学中心门诊６７份男性不孕患者的精液标本。 按ＤＦＩ值分为３组：ＤＦＩ正常组（ＤＦＩ≤１５％， ＝ ＝ ＝ ｎ ３８） 、轻度损伤组（１５％＜ＤＦＩ＜３０％，ｎ ２０） 和重度损伤组（ＤＦＩ≥３０％，ｎ ９）。 通过计算机辅助精子分析系统（ＣＡＳＡ）进行 精液检测，获得精液常规参数：前向运动精子百分率（ＰＲ）、精子密度及精子总活率。 提取精子中的总蛋白，Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ检测 Ｐｒｄｘ２ 的表达，免疫荧光检测精子中Ｐｒｄｘ２ 的定位。 并分析Ｐｒｄｘ２ 表达与ＤＦＩ、精液常规参数的相关性。 　 结果　 与ＤＦＩ正常 组Ｐｒｄｘ２相对表达水平（９．０６±１．８０）比较，轻度损伤组（６．３２±１．８９）和重度损伤组（２．８７±０．８３）分别下降了３０．２％、６８．２％，差异 有统计学意义（Ｐ＜０．０１）。 免疫荧光结果显示，Ｐｒｄｘ２主要定位于人精子中段线粒体以及精子头部核区域；重度损伤组和轻度 损伤组Ｐｒｄｘ２表达较ＤＦＩ正常组均降低，其中重度损伤组的Ｐｒｄｘ２ 阳性反应明显减弱。 Ｐｒｄｘ２蛋白表达与ＤＦＩ呈负相关（ｒ＝ － ＝ ０．４７８，Ｐ＜０．０１），与ＰＲ、精子总活率呈正相关（ｒ ０．１３５、０．１２８，Ｐ＜０．０１）。 　 结论　 Ｐｒｄｘ２对精子ＤＮＡ损伤患者中ＤＮＡ完整 性的影响可能通过维持细胞内氧化还原平衡，参与保护精子ＤＮＡ免受损伤，同时影响精子运动能力来实现。 　 　 ［关键词］　 过氧化氧化还原蛋白２；精子ＤＮＡ损伤；精子活动力 　 　 ［中图分类号］　 Ｒ６９８．２　 　 　 ［文献标志码］　 Ａ　 　 　 ［文章编号］　 １００８⁃８１９９（２０１８）０９⁃０９４８⁃０４ 　 　 ［ＤＯＩ］　 １０．１６５７１／ ｊ．ｃｎｋｉ．１００８⁃８１９９．２０１８．０９．０１０ Ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ ｂｅｔｗｅｅｎ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ Ｐｒｄｘ２ ｐｒｏｔｅｉｎ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｍａｔｕｒｅ ｓｐｅｒｍａｔｏｚｏａ ａｎｄ ｓｐｅｒｍ ＤＮＡ ｄａｍａｇｅ １ ２ ＹＡＯ Ｌｉａｎｇ⁃ｙｕ ，ＪＩＮＧＪｕｎ （１．Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ ＣｌｉｎｉｃａｌＭｅｄｉｃｉｎｅ，ＸｕｚｈｏｕＭｅｄｉｃａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｘｕｚｈｏｕ２２１０００，Ｊｉａｎｇｓｕ，Ｃｈｉｎａ；２．ＴｈｅＲｅｐｒｏｄｕｃ⁃ ｔｉｖｅＭｅｄｉｃａｌ Ｃｅｎｔｅｒ，Ｎａｎｊｉｎｇ ＧｅｎｅｒａｌＨｏｓｐｉｔａｌｏｆ ＮａｎｊｉｎｇＭｉｌｉｔａｒｙＲｅｇｉｏｎ，ＰＬＡ，Ｎａｎｊｉｎｇ ２１０００２，Ｊｉａｎｇｓｕ，Ｃｈｉｎａ） 　 　 ［Ａｂｓｔｒａｃｔ ］　 Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ　 Ｔｈｅ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｍｅｃｈａｎｉｓｍｓｕｎｄｅｒｌｙｉｎｇ ｓｐｅｒｍ ＤＮＡ ｄａｍａｇｅｒｅｍａｉｎｕｎｃｅｒｔａｉｎ．Ｔｈｉｓ ｓｔｕｄｙ ａｉｍｅｄｔｏ ｄｅ⁃ ｔｅｒｍｉｎｅ ｔｈｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ ｏｆ Ｐｒｄｘ２ ｐｒｏｔｅｉｎ ｂｅｔｗｅｅｎ ｎｏｒｍａｌ ａｎｄ ｄａｍａｇｅｄ ｓｐｅｒｍ ＤＮＡ，ａｎｄ ａｎａｌｙｚｅ ｔｈｅ ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ ｂｅｔｗｅｅｎ ｅｘ⁃ ｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ Ｐｒｄｘ２ｐｒｏｔｅｉｎｉｎｈｕｍａｎｍａｔｕｒｅｓｐｅｒｍａｔｏｚｏａａｎｄｓｐｅｒｍＤＮＡｄａｍａｇｅ．　 Ｍｅｔｈｏｄｓ　 Ｓｅｍｅｎｓｐｅｃｉｍｅｎｓｏｆ ｓｉｘｔｙ⁃ｓｅｖｅｎｍａｌｅｉｎ⁃ ｆｅｒｔｉｌｉｔｙ ｐａｔｉｅｎｔｓｗｅｒｅ ｃｏｌｌｅｃｔｅｄ．Ｔｈｅｙ ｗｅｒｅ ｓｅｐａｒａｔｅｄ ｉｎ ｔｈｒｅｅ ｇｒｏｕｐｓ ａｃｃｏｒｄｉｎｇ ｔｏ ｔｈｅ ｓｐｅｒｍ ＤＮＡ ｄａｍａｇ