Biochem-2010-x-酶引论.ppt

单体酶、寡聚酶、多酶复合体 单体酶：一般指只含一条多肽链的酶，也有含多条肽链的。 寡聚酶：由两个或两个以上亚基（肽链）组成的酶。 多酶复合体multienzyme complex：由几种酶组合成的聚合体。如脂肪酸合酶复合体含有7种酶和一种酰基载体蛋白。 * 动物的脂肪酸合酶fatty acid synthase, FAS * 酶的命名 习惯命名：依据两个原则 根据酶的底物命名：如水解淀粉的称淀粉酶；水解蛋白的称蛋白酶。 根据催化反应的性质：如水解酶、氧化酶等。 国际系统命名法：明确标出酶的底物和所催化反应的性质类型，如乙醇：NAD+氧化还原酶。 * 酶的分类 国际系统分类法：国际酶学委员Enzyme Commission (EC)会根据各种酶所催化反应的类型，把酶分为六大类： 氧化还原酶 oxidoreductases 转移酶 transferases 水解酶 hydrolases 裂合酶 lyases 异构酶 isomerases 连接酶 ligases * 1. 氧化还原酶 催化氧化还原反应的酶，又分为两类： 氧化酶：催化底物脱氢，并氧化生成H2O2或H2O。 * 氧化酶：催化底物脱氢。 2. 转移酶 transferases 催化某些化学基团的转移，将一种分子上的某一基团转移到另一种分子上。如：氨基、羰基、酰基、磷酸基等。 * 3. 水解酶 hydrolases 催化水解反应的酶类。水解酶类大都属于细胞外酶，在生物体内分布最广，数量也多。可以水解酯键、糖苷键、肽键等。常见的有蛋白酶、淀粉酶、核酸酶和脂肪酶等。 * 4. 裂合酶 lyases 催化从底物移去一个基团而形成双键的反应。 * 5. 异构酶 isomerases 催化各种同分异构体之间的转变，即分子内部基团的重新排列。包括差向异构酶、顺反异构酶等。 * 6. 连接酶 ligases 或合成酶 synthetases 催化有ATP参加的合成反应，将两种物质合成一种新物质。 * 关于酶专一性原理的假说 “锁与钥匙”：Emil Fisher，1894年，以此说明酶与底物之间结构上的互补性，但是酶分子并不是象锁那样刚性的结构。 “诱导契合”：1958年Daniel Koshland提出，底物与酶结合的过程是一个互动过程，当底物与酶接近时会诱导酶分子发生构象改变，更有利于底物的结合，酶与底物在此基础上发生互补契合。 在此过程中底物的构象也发生调整，被酶诱导最终采取‘过渡态’的构象，形成酶-过渡态复合体。 这种假说是对酶专一性更准确的描述。酶分子是非常有柔韧性的分子，其构象是处于动态变化中的。 * 酶的专一性 例如：己糖激酶只催化己糖分子的磷酸化，甘油和水等小分子虽然能接近活性中心但却不能作为底物，因为只有己糖分子能够诱导己糖激酶成为有催化活性的构象。 * 酶的活力(enzyme activity)测定 酶活力是其催化一个化学反应的能力。 酶单位：在一定条件下，一定时间内将一定量的底物转化为产物所需要的酶的量。 国际单位(International Unit, IU)：在最适反应条件下，1分钟内催化1微摩尔(μmol)产物形成所需的酶的含量为一个酶活力单位。 另外一种单位Katal：在最适条件下1秒钟内催化1mol产物形成所需要的酶的量。1Katal=6.0x107IU。 比活力specific activity：每毫克(mg)蛋白质样品所含的酶活力单位数。可代表酶的纯度。 * 酶促反应速率的测定 测出不同时刻产物浓度，对时间作图得一曲线，曲线上某一点的斜率即是该时刻的酶促反应速度。 测定产物浓度常用分光光度法。 * 酶促反应速率的测定 因为反应会随着时间而减慢，所以为了准确、真实地测定一个酶样品的活性，最好是测定反应的初速率。 反应时间要短（5mim），底物浓度变化不超过初始浓度的5%，反应的曲线为直线。 酶活力测定：使底物过量，酶分子被底物分子饱和，这样反应速度只取决于酶的催化能力和浓度。 通常要作两条曲线：酶反应进程曲线和酶浓度对初速度的曲线。 * 核酶 ribozyme 1982年 Cech发现四膜虫的rRNA在成熟的过程中需要切去内含子片段，这个切除和拼接的过程是完全由rRNA分子自身催化的，也称自我剪接。 1983年Altman等发现大肠杆菌的RNase P的RNA成分是这个酶的真正有催化活性的部分，蛋白部分没有催化活性。 Noller等证明原核生物核糖体50S亚基的23S rRNA自身能够独立催化蛋白质合成中肽键形成的步骤。 * 四膜虫 核酶 这些RNA分子具有酶的几个特征： 具有高度的底物专一性 能提高反应速度，反应后自身不发生改变 反应遵循米氏动力学，并对竞争性抑制剂敏感 核酶的催化大部分依赖于H键，催化