TGFβ1与Smad23在乳腺癌组织中的表达及意义.docVIP

TGF3 1与Smad23在乳腺癌组织中的表达及意义 ［ ］目的研宄TGF 0 1与Smad2/3在乳腺癌 组织中的表达，揭示其在乳腺癌中的信号转导通路。 方法应用免疫组化SABC法检测62例乳腺癌组织中 TGF M与Smad2/3的表达情况，利用SPSS19.0统计 学软件分析TGF 3 1与Smad2/3的差异性及相关性。 结果TGFP 1与Smad2/3在乳腺癌组织中呈高表达， 阳性表达率依次为69.35%(43/62)和40.32%( 25/62)。 TGFP 1与Smad2/3在乳腺癌组织中的表达与年龄无 关，TGF3 1与Smad2/3在组织学分级、病理学分类、 TNM分期方面差异均有统计学意义(P ［关键词］乳腺癌；TGF 3 1； Smad2/3；相关性 ［ ］R737.9 ［ ］A ［ ］ 1673-9701 (2015)17-0011-03 转化生长因子 3 (transforming growth factor beta, TGFP )是一族能引起细胞产生表型变化、具有多种生 物学功能的蛋白多肽，可调节多种正常细胞或瘤细胞 的生长分化。目前研究［1，2］表明：TGF0/Smads信号 途径不仅在细胞及生物体生长和发育过程中起重要作 用，而且与人体肿瘤的发生、发展有密切关联。TGF /Smads信号转导途径中一旦发生异常就可引起信 号转导紊乱，从而导致肿瘤的发生［3］。所以探讨TGF 3 1与Smad2/3在乳腺癌组织中的表达，有利于揭示 其在乳腺癌中的信号转导通路。 1资料与方法 1.1 一般资料 选取阜新市中心医院2004?2014年间62例乳腺 癌存档标本。患者年龄27?78岁，平均49岁。组织 学分级按照Elston等［4］提出的Bloom-Richardson分级 （即Nottingham分级），对每例乳腺癌组织从腺管形 成、核分裂数和癌细胞异型性3个方面进行评分，按 所得总分进行分级:3?5分为I级，6?7分为II级， 8?9分为III级，I级14例，II级25例，III级23例。 病理学分类方法参照WHO1981年制定的乳腺癌分类 ［5］：导管内癌8例、浸润性导管癌48例、浸润性小 叶癌4例、浸润性特殊癌2例。根据国际抗癌联盟（UICC） 关于TNM分期方法［6］进行临床分期：I期8例，II 期14例，III期32例，IV期8例。 1.2试剂及方法 1.2.1主要试剂鼠抗人TGF 0 1多克隆抗体，鼠 抗人Smad2/3多克隆抗体（美国，Santa Cruz）, SABC 免疫组化染色试剂盒，DAB显色盒（武汉博士德生物 工程有限公司）。 1.2.2方法应用免疫组织化学染色SABC法观察 TGF 0 1与Smad2/3在乳腺癌中的表达分布情况。切片 常规脱蜡至水，浸入枸橼酸盐缓冲液，然后微波加热 15 min,室温冷却后PBS冲洗3次；用3%H2O2室温 (10 min)灭活内源性酶，PBS冲洗3次；湿盒内滴加 5%BSA封闭液，室温(20 min)甩去多余液体，不洗； 滴加稀释度为1 : 100的一抗，4°C过夜，PBS冲洗3 次；滴加生物素化山羊抗兔IgG，37°CT30min, PBS 冲洗3次；滴加试剂SABC，37°C下30min，PBS冲洗 4次(以上PBS浓度均为0.01 mol八)；DAB显色，室 温控制反应，蒸馏水充分洗涤；苏木素轻度复染，梯 度酒精脱水，二甲苯透明，中性树胶封片，显微镜下 观察。每次染色流程均设有对照作为染质量控制标准。 阳性对照用Santa Cruz公司已证实的阳性TGF 3 1与 Smad2/3切片为对照，以PBS代替一抗作为阴性对照， 至少由2名有经验的病理医师独立观察切片。 1.2.3结果判定在200倍视野下随机选取5个视 野，记数每个视野中肿瘤上皮细胞的染色情况，取平 均值。TGF0 1与Smad2/3阳性着色位于细胞质中呈弥 漫或散在的棕黄色颗粒。根据瘤组织中阳性细胞的有 无及数量，将其分为阴性(-):未见阳性细胞；弱阳 性( + )：阳性细胞少于10%;阳性(++)：阳性细胞 11%?30%;强阳性(+++)：阳性细胞多于30%［7］。 1.3统计学处理 采用SPSS 19.0统计学软件包进行数据分析，采用 x 2检验或Fisher精确概率法分析TGF P 1与Smad2/3 在乳腺癌中阳性表达的差异性，Spearman相关分析 TGFP 1与Smad2/3在乳腺癌中阳性表达的相关性。 P0.05), TGF0 1与Smad2/3在组织学分级、病理学分 类、TNM分期组中的表达差异均有统计学意义(P 3讨论 乳腺癌的发生是由多种异常癌基因和抑癌基因共 同作用的积累。癌基因的激活和抑癌基因的失活导致 宿主代谢发生改变，细胞信号转导失常，从而导致细