广西科技大学生物工程概论复习题.pdfVIP

1、 生物工程的研究内容有哪几大方面。 基因工程、细胞工程、酶工程、发酵工程、蛋白质工程 2、何谓基因工程。基因工程有哪几个基本操作程序？ 也叫DNA 重组技术，是指对遗传信息的分子操作和施 工，即把分离到的或合成的基因经过改造，插入载体中，导 入宿主细胞内，使其扩增和表达，从而获得大量基因产物， 或者令生物表现出新的性状. 第一步 ：目的基因的获取 1.目的基因是指：编码蛋白质的结构基因. 2.获取目的基因的常用方法有基因文库法、逆转录法、 化学合成法和PCR 法. 第二步：基因表达载体的构建 1.组成： 目的基因＋启动子＋终止子 ＋标记基因 （1）启动子：是一段有特殊结构的 DNA 片段，位于 基因的 首端，是 RNA 聚合酶识别和结合的部位， 能驱动基因转录出 mRNA，最终获得所需的蛋白质 。 （2）终止子：也是一段有特殊结构的DNA 片段，位 于基因的 尾端。 （3）标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中是否含 有 目的基因 ，从而将含目的基因的细胞的筛选出来。常 用的标记基因是 抗生素基因 第三步： 将目的基因导入受体细胞 。 1.转化的概念：是目的基因进入受体细胞内，并且在受 体细胞内维持稳定和表达的过程 3、何谓发酵工程？发酵工程包括哪几大基本步骤？ 是将DNA 重组及细胞融合技术、酶工程技术、组学及代谢 网络调控技术、过程工程优化与放大技术等新技术与传统发 酵工程融合，大大提高传统发酵技术水平，拓展传统发酵应 用领域和产品范围的一种现代工业生物技术体系（新一代工 业生物技术） （1）菌种选育；（2）细胞大规模培养即发酵过程；（3）生 产活性产物的诱导； （4）菌体及产物的收获 4、何谓蛋白质工程？ 指在研究蛋白质分子结构及其与生物功能之间关系的基础 上，对编码该蛋白质的进行有目的的设计和改造，并通过基 因工程等手段进行表达和分离，最终获得性能比自然界中存 在的蛋白质更优良、更加符合人类社会需要的新型蛋白质。 5、 简述生物工程 （技术）对人类的作用 1） 改善农业生产，解决世界粮食短缺 2） 提高生命质 量，延长人类寿命 3）解决能源危机，治理环境污染 4） 制造工业原料， 生产贵重金属 6、 何谓限制性内切酶、DNA 连接酶、DNA 聚合酶？ 凡能识别和切割双链DNA 分子内特殊核苷酸序列的酶统 称为限制性内切酶 DNA 黏合酶 （EC6.5.1.1），也称DNA 连接酶，在分子生 物学中扮演一个既特殊又关键的角色，那就是把两条 DNA 黏合成一条。无论是双股或是单股DNA 的黏合， DNA 黏合酶都可以借由形成磷酸双脂键将DNA 在3端 的尾端与5端的前端连在一起。 DNA 聚合酶是生物催化合成脱氧核糖核酸(DNA)和核糖 核酸(RNA)的一类酶的统称 7、 何谓PCR？ PCR Polymerase Chain Reaction （ ）即聚合酶链式 反应，是指在DNA 聚合酶催化下，以母链DNA 为模板，以 特定引物为延伸起点，通过变性、退火、延伸等步骤，体外 复制出与母链模板DNA 互补的子链DNA 的过程。 8、 何谓反向PCR？ 是用反向的互补引物来扩增两引物以外的未知序列的片段, 其目的在于扩增一段已知序列旁侧的DNA ，也就是说这一反 应体系不是在一对引物之间而是在引物外侧合成DNA 。反向 PCR 可用于研究与已知DNA 区段相连接的未知染色体序 列，因此又可称为染色体缓移或染色体步移 9、 何谓锚定PCR？ 用于扩增已知一端序列的目的DNA。在未知序列一端加上一 段多聚dG 的尾巴，然后分别用多聚dC和已知的序列作为引 物进行PCR扩增，主要用于分析具有可变末端的DNA序列 10、基因克隆载体应具备的条件是什么？基因表达载体的主 要组成有哪些？ ①具有一至多个限制酶切点，供外源DNA 片段插入 ②能在受体细胞中复制并稳定保存 ③具有标记基因，供重组DNA 的鉴定和选择 组成