VEGF、HIF１α在脑胶质瘤中的表达及相关性研究.docVIP

VEGF、HIF — 1 a在脑胶质瘤中的表达及相关性研宄 吴林薛际航张占普 内蒙古医科大学附属医院神经外科内蒙古呼和浩特010050 目的木研究旨在探讨VEGF、HIF- 1 alpha;在不同病理级別的 脑胶质瘤中的表达情况及二者之间的相关性，阐明其内在机制，以期在胶质瘤的治 疗方面获得突破性进展.方法采用免疫组织化学SABC法检测VEGF、HIF- 1 alpha;表达蛋白在6 4例不同病理分级的胶质瘤及5例正常脑组织中的表达情 况.结果VEGF、HIF- 1 alpha;在正常脑组织中均无表达;在6 4例胶质瘤 中,VEGF阳性表达为4 5例、占7 0 . 3 %,HIF— 1 alpha;阳性表达为4 7例、 占7 3 ? 4 %,1 — II级、III级和IV级间的表达有显著性差异(P 0.05 ).且胶 质瘤中VEGF的表达与HIF- 1 alpha;表达密切相关(rs 0 . 7 2 0 ,P 0 . 0 1}. 结论VEGF、HIF- 1 alpha;表达有一定的相关性，其表达与胶质瘤的恶性程度成 正相关，共同在胶质瘤的血管形成过程中起重要作用. 关键词 胶质瘤；VEGF; HIF- 1 alpha; R 7 3 9 . 4 B 1 0 08 — 63 1 5 ( 2 0 1 5)1 2 — 03 5 4 — 02 脑胶质瘤是来源于神经上皮的、颅内最常见的恶性肿瘤，约占全部颅内肿瘤 的4 0 %— 5 0 %.其具有血供丰富和侵袭性增殖的生物学特征，血管生成在其生 长和侵袭过程中起重要作用.血管内皮生长因子 (vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)足现枉研究较多的促进肿瘤血管生成的物 质,VEGF的表达受各种因素调控,缺氧是迄今为止发现的最强的诱导VEGF表达因 素［1 — 3 .缺氧诱导因子 1 (hypoxiainduciblefactor 1 ,HIF— 1 )是由 HIF— 1 alpha;、HIF— 1 beta;组成的异源二聚体转录因子，其中HIF — 1 alpha;是专一 受氧调节的亚单位,决定了 HIF- 1的活性.VEGF和HIF- 1 alpha;在肿瘤的新生 血管生长过程中起到非常重要的作用［4、5 ］. 1.1实验标本收集10年一13年内蒙古医科大学神附属医院经外科 手术切除、且保存完好的6 4例脑胶质瘤组织的石蜡标本，所有标本均经病理检 査确诊.术前均未行放、化疗，冇完整的临床病历资料，其中男性3 8例，女性2 6例, 年龄1 8-6 4岁，平均年龄为3 8.4 2岁.胶质瘤的分类及分级诊断标准参照 2 0 0 0年WHO的新标准，包括I一 II级胶质瘤2 6例，其中星形细胞瘤1 2例、 混合型星形细胞瘤6例、少突胶质细胞瘤5例、室管膜瘤3例;III级胶质瘤1 8 例，其中间变性星形细胞瘤9例、间变性室管膜瘤3例、间变性少突星形细胞瘤 6例;IV级胶质瘤2 0例、其中胶质母细胞瘤1 4例、髓母细胞瘤4例、胶质肉瘤 2例.(见表1. 1)另5例作为对照的正常脑组织,均取自神经外科因急性颅脑 损伤行内减压术的患者，取材后以1 0 %福尔马林固定，常规洒精脱水、石蜡包埋, 用于免疫组化. 1.2 主要试剂及方法兔抗人HIF- 1 alpha;(即用型)多克隆抗体 及兔抗人VEGF (即用型)单克隆抗体均购自武汉博士德生物技术有限公司.免疫 组化染色试剂盒(SABC)购自武汉博士德生物技术冇限公司.采用SABC法检测，按常 规步骤进行.1 . 3 结果判定方法及标准HIF- 1 alpha;阳性表达部位主要 在胞核，而VEGF阳性表达部位主要在胞浆，呈棕色或棕黄色颗粒状.随机观察1 0 个高倍镜视野，按每高倍镜视野阳性细胞数百分比记分:阳性细胞数小于5 %为0 分;阳性细胞数为5 — 2 5 %为1分;阳性细胞数为2 6 — 5 0 %为2分;阳性细 胞数为5 1 -7 5 %为3分;阳性细胞数大于7 5 %为4分.同吋按着色强度记分: 染色弱，呈淡黄色者记为1分;染色中等,呈黄色者记为2分;染色强，呈棕黄色者记 为3分.两种记分的乘积决定病例的阳性与否:0分为阴性(一)；1 一 4分为弱阳 性( + ),5-8分为中度阳性( + + ),9-1 2分为强阳性(+ + +)[ 6-、7].实验 中设立阴性和空闩对照，以山羊血清代替一抗作为阴性对照、以PBS代替一抗作 为空白对照，结果均为阴性. 1.4 统计学分析数据应用SPSS 10.0统计软件包进行统计学处理. 组间比较应用x 2检验,HIF— 1 alpha;与VEGF蛋白两者关系用spearman等级相 关分析，以P0. 0 5为有统计学意义.2结果2. 1 VEGF在胶质