丁苯酞预处理对大鼠脑缺血再灌注损伤的神经保护作用.pdfVIP

L 丁苯酞预处理对大鼠脑缺血再灌注损伤的神经保护作用 硕士研究生： 白艳娟 指导教师： 辛世萌教授 指导小组： 尹琳教授 专业名称： 神经病学 摘要 性脑缺血再灌注(MCAO)模型，通过观察神经功能缺损程度，测定脑梗死体积， 检测脑组织内半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶一3(Caspase．3)、Bcl．2表达的变化， 研究丁苯酞预处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的神经保护作用。 方法：健康成年SD雄性大鼠48只，体重200．2509，清洁级，室温环境饲养， 自由进食水。按随机原则分为假手术组、缺血再灌注组、丁苯酞预处理后脑缺血 再灌注组(丁苯酞预处理组)，每组各16只。丁苯酞预处理组于术前5天开始予丁 苯酞溶剂(以丁苯酞胶囊溶于生理盐水配成lOmg／ml混悬液，用前充分摇匀)以200 mg／kg／d的剂量进行灌胃，1次／天；假手术组和缺血再灌注组亦均于术前5天开始 以等体积生理盐水(O．9％氯化钠溶液)灌胃，1次／天。 参照Zea-Longa线栓法制作大鼠右侧大脑中动脉局灶性脑缺血再灌注 术组仅暴露右侧颈总动脉，余不做其他处置)。 参照ZevLonga5分制评分标准进行神经功能缺损评分，各组达再灌注时间点 tetrazalium 后，断头取脑，分别行(1)2％氯化．2，3，5．三苯基四氮唑(2，3，5．Triphenyl 检测方法观察Caspase．3、Bcl．2表达的变化。 结果： 1、神经功能缺损评分：假手术组无神经功能缺损，评分均为0分；与假手术 组相比，缺血再灌注组及丁苯酞预处理组均有明显的神经功能缺损症状，有显著 性差异(PO．01)；与缺血再灌注组相比，丁苯酞预处理组神经功能缺损程度减轻， 差异有统计学意义(P0．05)。 2、脑梗死体积测定：假手术组为正常脑组织，无梗死灶，呈红色；与假手术 组相比，缺血再灌注组及丁苯酞预处理组均有明显的白色梗死灶，有显著性差异 (PO．01)：与缺血再灌注组相比，丁苯酞预处理组梗死灶体积减小，差异有统计 学意义(P0．05)。 3、HE染色：假手术组为正常脑组织，其组织排列层次分明，视野可见形态 结构正常的神经细胞；缺血再灌注组于缺血部位可见排列紊乱的脑组织，神经细 胞皱缩变性，细胞组织间水肿，并可见空泡样改变；与缺血再灌注组相比较，丁 苯酞预处理组缺血部位神经细胞变性、坏死的数量有所减少，空泡样改变及组织 间水肿程度有所减轻。 4、免疫组织化学检测： 手术组相比，缺血再灌注组及丁苯酞预处理组均可见较多的C硒pase．3阳性细胞表 阳性细胞数量减少，差异有统计学意义(P0．05)。 (2)Bcl．2的表达：假手术组Bcl．2阳性细胞仅见少量表达；与假手术组相 比，缺血再灌注组及丁苯酞预处理组均可见较多的Bcl．2阳性细胞表达，有显著性 差异(P0．01)；与缺血再灌注组相比，丁苯酞预处理组Bcl一2阳性细胞数量增加， 差异有统计学意义(Po．05)。 结论： l、C嬲pase．3和Bcl．2的表达均参与了脑缺血再灌注损伤的过程，其中， CaspaLse．3促进神经细胞凋亡的发生，而Bcl．2则起到了抑制神经元凋亡的作用。 2、丁苯酞药物预处理的方法可以减轻SD大鼠脑缺血再灌注所致的损伤程度， 减轻神经功能缺损症状，缩小脑梗死灶的体积，减少神经细胞变性、坏死的数量， 并可使促凋亡细胞C嬲pase．3表达数量减少，抗凋亡细胞Bcl．2表达数量增加。 3、丁苯酞可减轻缺血性脑血管病的发生程度，具有一定的神经保护作用。 Bcl-2 关键词：丁苯酞预处理脑缺血再灌注损伤CaSpase-3 2 themethodofNBP focalischemia objective：Applying preconditioning，use modelof re