基因操等作的工具酶.pptVIP

* * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 3.T4 DNA聚合酶 来源：从T4噬菌体感染的E.coli中分离得到 具5’ 3’聚合酶活性和3’ 5’外切酶活性 * Taq DNA聚合酶是从栖热水生菌(Thermus aquaticus)中分离纯化的依赖DNA的DNA聚合酶，最适温度75℃-80℃ 需要Mg2+(10 mmol／L)，在低浓度Mn2+(2 mmol/L)中有低活性，Ca2+使其完全失活，一价阳离子高至0.1 moI／L对活性无影响，而最适浓度NaCl为40 mmol/L，KCl为60 mmol/L 最适pH7.8(Tris-HCl)，与大肠杆菌DNA聚合酶相比，其最大特性是耐高温和无核酸酶活性 自1976年从Thermus aquaticus菌中分离纯化后，直至1985年PCR概念形成，才将此酶应用于PCR技术的建立和完善。对基因克隆、测序、突变研究和检测诊断等方面发挥巨大作用 4.Taq DNA聚合酶 * 5.逆转录酶 一种有效的转录RNA成为DNA的酶，即以RNA链为模板，以带3’-OH末端的DNA片段为引物，沿5’ 3’方向合成DNA链 产物DNA又称cDNA，即互补DNA 逆转录酶又称RNA依赖的DNA聚合酶（RNA-dependent DNA