脂质和脂蛋白代谢紊乱的生物化学检验222012.11.19.ppt

正常人群的Lp(a)水平呈明显的正偏态分布，大多在200mg/L以下，平均数在120～180 mg/L，中位数约100mg/L。Lp(a)水平高于医学决定水平（300mg/L），冠心病危险性明显增高。 【参考值】 【临床意义】 血清Lp(a)水平是动脉粥样硬化性疾病的独立危险因素,与动脉粥样硬化成正相关。 载脂蛋白(Apo)测定 　免疫比浊法: 透射比浊、散射比浊 载脂蛋白的特异抗体与血清中相应的抗原结合形成抗原抗体免疫复合物,并形成微细颗粒,混悬于溶液介质中,光线通过浑浊介质溶液时,被吸收一部分,吸收的多少与混浊颗粒的量成正比.在抗体量一定的条件下,抗原越多,抗原抗体复合物越多,溶液越浑浊,吸收光越多,以此对抗原定量,这种通过测定光吸收量的方法称为透射比浊法. 　　Apo AⅠ是 HDL的主要结构蛋白，Apo Ｂ是 LDL的主要结构蛋白，因此，Apo AⅠ 和Apo B可直接反映HDL和LDL含量。冠心病、 肾病综合症和糖尿病等都有ApoAⅠ减少和Apo B的升高。临床上将ApoAⅠ和ApoＢ比值作为冠心病的危险指标。 【参考值】： Apo AI：1.00～1.50g/L，Apo B：0.80～1.00g/L。 【临床意义】 ApoAI是HDL的主要结构蛋白， ApoB是LDL的主要结构蛋白，因此，ApoAI和ApoB可直接反映HDL和LDL的含量。在某些病理情况下，ApoAI与HDL和ApoB与LDL并非成正相关，因此，同时测定载脂蛋白及脂蛋白HDL和LDL对病理发生状态的分析很有帮助。冠心病、肾病综合征和糖尿病等都有ApoAI下降和ApoB升高。临床上常将ApoAI和ApoB比值作为冠心病的危险指标。 　临床检验诊断项目，推荐血浆（清）TＣ、ＴＧ、HDL-C、LDL-C 和LP(a)为常规检测项目，必要时再加测血浆（清）Apo AⅠ 和Apo Ｂ含量。基因检查项目以ApoE基因型分析有一定临床意义。 * * 　　脂蛋白和脂质测定方法学评价 血浆脂蛋白和脂质测定是临床生化检验的常规测定项目。 临床意义 ☆ 早期发现与诊断高脂蛋白血症 ☆ 协助诊断动脉粥样硬化症 ☆ 评价动脉粥样硬化疾患如冠心病和脑梗死等 的危险度 ☆ 监测评价饮食与药物治疗效果 血脂、脂蛋白及载脂蛋白测定 目前临床上开展的血脂测定项目包括TC、TG、HDL及其亚类胆固醇、LDL-C、Lp（a）以及部分载脂蛋白如ApoAI、ApoB等。其中TC、TG、HDL-C、LDL-C测定是血脂测定的四个基本指标。血浆4℃冰箱中过夜观察其分层现象及清澈度可初步估计各种脂蛋白的变化状况。血浆脂蛋白电泳结合TC、TG水平有助于高脂血症分型。 概况： 血脂测定标准化： 血脂分析前变异来源于： ①生物因素，如年龄、性别、种族等因素的个体差异。 ②生活方式，包括饮食习惯、吸烟、运动及应激等。 ③临床方面包括疾病或药物引起的脂代谢改变。 ④血标本采集与处理方面 准确测定应从分析前的准备开始，包括受试者的准备，标本 采集，合格的试剂、校准物的选用，检测方法选择。 方法学上应该采用美国疾病控制中心（CDC）或中华医学会检验分会推荐的操作方法。 受试者的准备 采血前2周保持平时的饮食习惯 采血前24小时内不饮酒、不做剧烈运动 嗜烟者(每日超过20支)血清中总胆固醇及甘油三酯水平升高；长期大量饮酒会使血脂升高。 禁食12小时以上 妊娠后期各项血脂都会增高 注意有无应用影响血脂的药物，如降血脂药、避孕药等。 除非是卧床病人，一般在采血时取坐位。体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。 在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带。 检测范围 血浆脂质测定（TC TG) 血浆脂蛋白测定(HDL-C LDL-C) 载脂蛋白测定(ApoA ApoB) 血浆脂代谢相关蛋白与酶的测定 脂质相关蛋白基因突变分析 一、血浆脂质测定 （一）总胆固醇测定（化学抽提法、酶法） 1、化学法： 抽提→皂化→洋地黄皂苷沉淀纯化→显色比色 干扰因素多，准确测定有赖于从标本中抽提、皂化、纯化过程，因而操作较繁，不适于分析大批量标本，且不适于自动分析。 2、酶法：胆固醇氧化酶- 过氧化物酶-4-氨基安替比林和酚法 (CHOD-PAP法） 第一反应：生成游离型胆固醇 胆固醇酯+H2O 胆固醇脂酶CHE 游离胆固醇＋游离脂肪酸 第