利用生物工程法制备重组胰岛素资料.pptVIP

构建与表达 2005级生命科学基地班 杜鹃 苗春晖 李嫄 王立军 1、胰岛素的结构 胰岛素是一条多肽，分子质量5734，由51个氨基酸组成。它含有A、B两条链，A链由21个氨基酸组成，B链由30个氨基酸组成，它们之间有两条二硫键A7-B6、A20-B19。此外，A链自身在6 与11位有第三条二硫键 2.用基因工程方法生产人胰岛素主要途径 一种是胰岛素原途径，即基因工程所生产的是胰岛素原或是其类似物，然后将胰岛素原或者其类似物体外转化为胰岛素。 另一种是A，B链重组途径，即用基因工程方法分别产生胰岛素A，B链，纯化的A，B链再经重组产生胰岛素。 人胰岛素原类似物BKRA基因的合成 将BKRA基因分成6个片段合成，其中F1、F3、F5片段为正向链，F2、F4、F6片段为反向链（Fig.1）。将各基因片段按等摩尔数混合、退火：以Klenow片段完成中间补链和末端补平，获得含有限制性酶切位点的BKRA基因片段，全长 182bp。 BKRA片段基因结构 GGG AAT TCT ATG TTC GTT AAC CAG CAC CTG TGT GGC TCT CAC CCC TTA AGA TAC AAG CAA TTG GTC GTG GAC ACA CCG AGA CTG CTC GTA GAA GCT CTG TAC CTG GTT TGC GGT