[医学微生物学]细菌感染及免疫.pptVIP

3.生化试验 糖发酵,蛋白质分解试验。 4.血清学试验 细菌玻片凝集,用抗体进行种,型鉴定。 5.动物试验 小鼠,豚鼠,家兔;结核痰液注射豚鼠,杂菌死亡;发病后解剖,得纯培养结核菌。 6.药物敏感试验 单片纸碟法-抑菌直径,试管-MIC。 紫 红 酒 新 来 （三）病原菌抗原的检测 酶免疫技术 酶联免疫吸附法,免疫组化法。 协同凝集试验 SPA吸附抗体,检测抗原。 免疫荧光技术 荧光菌球,培养4-6hr。 对流免疫技术 脑膜炎球菌抗原检测。 免疫印记技术 聚丙烯凝胶酰胺电泳,转印检测细菌蛋白。 24孔板, 加入抗体,加入待检标本,加入酶标记抗体,底物,显色 酶免疫技术 免疫荧光技术 对流免疫电泳 流脑病人脑脊液 （四）检测病原菌核酸 核酸杂交技术 同位素标记核酸单链作为探针,与待测标本中核酸单链互补形成双链,仪器检测。 PCR技术 核酸体外扩增 DNA或RNA 体外扩增,将同一基因扩增几百万倍后凝胶电泳, 快速,敏感,特异。 基因芯片技术 新近发展起来的核酸序列分析技术,自动化检测,微机处理,同时检测大量标本。 （五）其它方法 噬菌体分型; 细菌L型检测; 气相色谱检测细菌代谢物; 13C,14C呼吸试验检测幽门螺杆菌产生的尿素酶。 二 血清学诊断 用已知细菌或特异性抗原,检测血清中抗体。 用于病程较长的感染性疾病的诊断,伤寒。 检测疫苗接种效果。 明显高于正常效价;双份血清升高4倍。 常用方法 直接凝集试验;补体结合试验;中和试验;乳胶凝集试验;ELISA。 第二节 细菌感染的特异性预防 一 人工主动免疫 将疫苗或类毒素接种人体,刺激免疫系统产生特异性免疫应答,获得免疫力,天花。 （一）疫苗 1.死疫苗 病原菌大量培养杀死,保留抗原性。 多次接种,接种量大,反应明显,只激发体液免疫,不产生CTL。 伤寒,霍乱,流脑,钩体等。 2.减毒活疫苗 通过毒力变异获得减毒或无毒株,培养后制成疫苗。 宿主体内繁殖,停留长,类似隐性感染。 接种一次,用量小,副作用轻,效果好。 不易保存,4℃,二周。 回复毒力,重新获得致病性。 BCG,鼠疫,炭疽,脊髓炎,麻疹。 3.亚单位疫苗 微生物的保护性抗原,不含核酸。 去除引发副反应物质,无毒性； 不含核酸成分,避免回复突变发生。 肺炎球菌,脑膜炎球菌,荚膜多糖抗原。 4.基因工程疫苗 将编码病原菌保护性抗原的目的基因,导入原核或真核细胞表达,制成疫苗。 5.重组载体疫苗 将抗原编码基因转入减毒的病毒或细菌制成疫苗,接种后在体内繁殖表达,似活疫苗。 如以痘苗病毒为载体,用于甲肝,乙肝,麻疹疫苗的研制。 6.核酸疫苗 将编码产生抗原的基因重组到质粒真核表达载体上,将重组的质粒DNA直接注射给人体表达。 优点:抗原持续产生,免疫持久;体液和细胞免疫;对不同亚型病原有交叉保护;将不同抗原基因构建在同一质粒-联合免疫。问题:DAN整合激活癌基因;产生抗核抗体诱导自身免疫病。 （二）类毒素 外毒素经0.3%甲醛处理后,失去毒性保留抗原性,加入佐剂制成。 氢氧化铝可延缓类毒素的吸收时间。 三联疫苗 白喉,百日咳,破伤风。 思考题 1.病原菌对宿主的致病性,由哪些因素决定？ 2.比较内毒素与外毒素的不同? 3.细菌的侵袭力,由哪些因素组成？ 4.感染的发展及其结果？ 5.医院感染的基本特点？怎样预防和控制？ 6.疫苗种类及各有哪些特点？ 医院感染的分类 内源性感染,自身感染： 抵抗力降低,正常菌群和潜在的病原菌。 外源性感染 交叉感染 患者之间或医护人员接触。 环境感染 消毒不严或污染的医疗用品;环境中微生物气溶胶吸入感染。 二 医院感染中的微生物特点 主要为条件致病性微生物 多属内源性感染;有时会出现外源性病原菌引起的暴发流行。 常具有耐药性 甚至多重耐药,铜绿,金葡。 常发生种类的变迁 20世纪50年代主要为G+球菌,70-80年代多为G-杆菌。 适应性强 营养要求低,潮湿环境可生长:土壤,水,尘埃,污染的医疗器械,空调循环水。 三 医院感染的流行病学特征 三要素:传染源,传播途径,易感者。 传染源 病人 最重要传染源,致病性强。 携带者 无明显症状,最危险的传染源。 环境贮源 病菌在医院中集中,多重耐药。 动物 医院鼠害,病原菌重要宿主,沙门菌。 传播途径 接触 直接接触;间接接触;飞沫传播。 空气 空气传播,微生物气溶胶,1-2米。 媒介物 水,食物,血制品,药物,医疗器具。 昆虫 鼠,蚊,蚤,蝇,蜱,蟑螂,叮咬传播。 医源性感染 注射,手术,输血,梅毒,AIDS,乙肝 易感者 决定于病原菌的毒力和宿主的易感性;医疗过程破坏原有的防御机能和微生态平衡,手术。 四 医院感染的危险因素 1.易感对象的年龄和基础疾病 老年人 器官老化,功能衰退,慢性病多。 婴幼儿 免疫器官发育不健全