高效液相色谱仪LC3000培训教程.docVIP

WORD格式..可编辑 PAGE 专业知识 整理分享 LC3000现场培训教程 ——基础部分 培训目的 A、了解LC3000高效液相色谱仪结构和基本操作。 B、掌握CXTH-3000色谱工作站的打开、设备连接、数据采集、数据处理，打印报告。 C、常见故障排除 培训设备 CXTH LC3000色谱仪 P3000高压输液泵 UV3000紫外检测器 7725i手动进样阀 T2000柱温箱（可选） C18色谱柱 250×4.6 5u （可选） 其它色谱基本条件（流动相准备、电脑和实验台等） 溶剂准备 1、条件：色谱级纯或者优级纯甲醇或者乙腈（ACN）、二次蒸馏水 2、流动相的过滤和超声 3、样品的前处理和过滤 LC3000色谱仪组成 P3000泵和UV3000检测器 一元（等度）系统 两元（梯度）系统 P3000泵界面和基本操作 高压输液泵 泵头 压力传感器+排空 泵壳体结构图 泵头以及传动结构图 单向阀 单向阀内部结构 基本操作：泵的基本操作可以通过CXTH-3000工作站（推荐使用）或者泵仪器面板控制。 工作站的控制在下面色谱工作站基本控制内容中讲到，以下是泵面板的基本控制按钮： PUMP/STOP 键：按一下该按键可以运行泵，再按一下停止泵运行。 START/HOLD键：按一下该键运行预先设定的程序链（PROGRAM）。再按一下保持此时的程序运行。 PURGE键：冲洗键。按一次泵按照（SYSTEM SETING）系统设定中设定冲洗流量运行冲洗。再按一次泵停止冲洗。作用：冲洗泵头气泡和快速更换流动相。 DEL键：退出键或者删除键。进入子菜单下通过此键退回上一菜单。 ENTER键：进入键或者确认键。按该键进入子菜单。 方向键：光标的上下左右移动。 2、UV3000检测器 UV3000紫外检测器 流通池 基本操作：检测器基本操作可以通过CXTH-3000工作站（推荐使用）或者检测器仪器面板控制。 波长的设定：按下 λ 按键 进入波长设定界面，通过数字键设定预设波长 TIME CONSTANT(时间常数)：在MAIN MENU主菜单下，按ENTER键进入第一项DETECTOR PARAMETERS，将光标移动到TIME CONTANT下修改合适的TC值。 RANGE(量程)设定：按下 RANGE 按键，进入量程设定界面，通过数字键设定波长。 检测器注意事项：流通池中有气泡的处理办法，流通池脏处理办法（见常见故障维护）。 3、7725i进样阀 7725i是6通道阀。阀的背面有数字标号： 2号口为流动相进口（泵连接到阀），3号口为流动相出口（阀连接到色谱柱） 1号口和4号口为定量环接口（默认连接的为20微升，可以更换） 5口和6口为废液口。 进样口为阀前端口（实际上7725i有7口） 以上俗称：2进3出、1、4定量，5、6废液。 基本操作： 进样阀前端有LOAD（装样）和INJECT(进样)两个标示。 当阀的把手在LOAD的状态下时，此时处于装样的状态，当样品注入后将阀扳到INJECT状态，进样过程完成。 进样注意事项： A、缓慢进样、快速扳阀。阀不要处于中间位置。 B、如果使用缓冲盐、当天使用后要使用含5%有机相的水溶液清洗进样阀。 4、色谱柱 色谱柱标示： 如：Kromasil 250×4.6 5u 100A分别代表填料名称 柱长 内径 填料大小 填料比表面积 色谱柱基本常识： 其他条件相同，柱子越长，保留时间越长。 其他条件相同，柱内径越小，柱压越高。 其他条件相同，柱填料颗粒越小，柱压越高。 不同品牌的色谱柱将有不同的特性，如保留时间、柱效等。 同等流速下，不同流动相的柱压将不同。包括流动相组分配比的变化也会导致压力变化。原因是：流动相组分的比例变化导致流动相粘度的变化，从而导致压力的变化。 基本安装注意事项： 避免死体积、漏液或损坏柱子 使用正确的接头 尽可能缩短连接管路长度、降低柱外效应 管路切口必须平整 在接上色谱柱前先将管路中的气泡赶净 色谱柱安装的方向性 接头不可拧太紧 打开输液泵、