植物原生质体培养技术 原生质体(Protoplast) 含义:去掉细胞壁的由质膜包裹、具有生活力的裸露细胞。 植物原生质体培养的意义 在真核生物中将遗传物质由一个个体传给另一个个体的传统方法是有性杂交。但是有时候会存在有性不亲和。 如果通过细胞融合的手段就可以为远缘杂交提供一种可能性。 高等植物原生质体除了可用于细胞融合的研究外,还能通过它们裸露的质膜摄入外源DNA、细胞器、细菌或病毒颗粒。 原生质体的这些特性与植物细胞的全能性结合在一起,已经在遗传工程和体细胞遗传学中开辟了一个理论和应用研究的崭新领域。 一 原生质体的分离 1 材料来源 植物原生质体最方便的来源是叶片,因为叶片中可以分离出大量的比较均一的细胞,而又不致使植物遭到致命的破坏。 由于叶肉细胞排列疏松,酶的作用很容易达到细胞壁。 植株的年龄和生长条件是十分重要的。 来源: ① 无菌苗 ② 温室培养的苗 培养条件: 低光照强度(1000lx) 短日照 温度为20~25℃ 相对湿度为60%~80% 以及充足的氮肥供应。 2 前处理
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