微囊藻毒素人工完全抗原制备与鉴定.PDFVIP

　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　２０１７（０５上）：１－４ 微囊藻毒素人工完全抗原制备与鉴定 １ １ ２ １ １ ２ １ 高　阳 ，林　超 ，郭一平 ，王　菡 ，潘　悦 ，聂红霞 ，任洪林 ， １ １ １ １ １ 胡　盼 ，李岩松 ，周　玉 ，柳曾善 ，卢士英 （１．吉林大学 人兽共患病研究所／人兽共患病教育部重点实验室，长春 １３００６２；２．大连众信 检测技术有限公司，辽宁 大连 １１６０４５） ＋ 中图分类号：Ｓ８５２．４３；Ｒ４４６．６ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００４－７０３４（２０１７）０５－０００１－０４ 关键词：微囊藻毒素（ＭＣｓ）；碳二亚胺法；偶联；人工完全抗原；免疫学检测 摘　要：为了研究微囊藻毒素－ＬＲ（ＭＣ－ＬＲ）的免疫学检测方法，试验制备了ＭＣ－ＬＲ人工完全抗 原，采用水溶性碳二亚胺法将微囊藻毒素的羧基与牛血清白蛋白（ＢＳＡ）的氨基偶联，同时利用琼脂糖 凝胶电泳、非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳、紫外扫描分析及ＥＬＩＳＡ等技术对偶联结果进行鉴定与分析。 结果表明：微囊藻毒素的羧基与 ＢＳＡ的氨基偶联成功。说明人工完全抗原制备成功，可用于ＭＣ－ ＬＲ的免疫学检测。 ＰｒｅｐａｒａｔｉｏｎａｎｄｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎｏｆａｒｔｉｆｉｃａｌａｎｔｉｇｅｎｏｆＭｉｃｒｏｃｙｓｔｉｎ－ＬＲ １ １ ２ １ １ ２ ＧＡＯＹａｎｇ，ＬＩＮＣｈａｏ，ＧＵＯＹｉｐｉｎｇ，ＷＡＮＧＨａｎ，ＰＡＮＹｕｅ，ＮＩＥＨｏｎｇｘｉａ， １ １ １ １ １ １ ＲＥＮＨｏｎｇｌｉｎ，ＨＵＰａｎ，ＬＩＹａｎｓｏｎｇ，ＺＨＯＵＹｕ，ＬＩＵＺｅｎｇｓｈａｎ，ＬＵＳｈｉｙｉｎｇ （１．ＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｆｏｒＺｏｏｎｏｓｉｓＲｅｓｅａｒｃｈ，ＭｉｎｉｓｔｒｙｏｆＥｄｕｃａｔｉｏｎ，ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＺｏｏｎｏｓｉｓ，ＪｉｌｉｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｃｈａｎｇｃｈｕｎ１３００６２， Ｃｈｉｎａ；２．ＤａｌｉａｎＺｈｏｎｇｘｉｎＴｅｓｔｉｎｇＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，ＬＬＣ，Ｄａｌｉａｎ１１６０４５，Ｃｈｉｎａ） Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：Ｍｉｃｒｏｃｙｓｔｉｎｓ；ｃａｒｂｏｄｉｉｍｉｄｅｍｅｔｈｏｄ；ｃｏｕｐｌｉｎｇ；ａｒｔｉｆｉｃｉａｌｃｏｍｐｌｅｔｅａｎｔｉｇｅｎ；ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌｄｅｔｅｃｔｉｏｎ Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＩｎｏｒｄｅｒｔｏｄｅｖｅｌｏｐｉｍｍｕｎｏａｓｓａｙｍｅｔｈｏｄｓｆｏｒＭＣ－ＬＲ，ｔｈｅＭＣ－ＬＲａｒｔｉｆｉｃｉａｌｃｏｍｐｌｅｔｅａｎｔｉｇｅｎｗａｓｐｒｅｐａｒｅｄ．Ｔｈｅｃａｒｂｏｘｙｇｒｏｕｐｏｆ ｍｉｃｒｏｃｙｓｔｉｎｗａｓｃｏｎｊｕｇａｔｅｄｗｉｔｈａｍｉｎｏｇｒｏｕｐｏｆｂｏｖｉｎｅｓｅｒｕｍａｌｂｕｍｉｎ（ＢＳＡ）ｂｙｕｓｉｎｇｃａｒｂｏｄｉｉｍｉｄｅｍｅｔｈｏｄ；ｔｈｅｐｒｅｐａｒｅｄＭＣ－ＬＲａｎｔｉｇｅｎ ｗａｓｖｅｒｉｆｉｅｄａｎｄａｎａｌｙｚｅｄｂｙｕｓｉｎｇａｇａｒｏｓｅｇｅｌｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ，ｐｏｌｙａｃｒｙｌａｍｉｄｅｇｅｌｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ，Ｕｖｓｃａｎｎｉｎｇａｎａｌｙｓｉｓ，ａｎｄＥＬＳＩＡｔｅｃｈｎｏｌｏ ｇｙ．Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｄｅｍｏｎｓｔｒａｔｅｄｔｈａｔｔｈｅｃａｒｂｏｘｙｌｇｒｏｕｐｏｆｍｉｃｒｏｃｙｓｔｉｎｗａｓｓｕｃｃｅｓｓｆｕｌｌｙｃｏｎｊｕｇａｔｅｄｗｉｔｈｂｏｖｉｎｅｓｅｒｕｍａｌｂｕｍｉｎ（ＢＳＡ）．Ｔｈｉｓｄａｔａ ｉｎｄｉｃａｔｅｄｔｈａｔｔｈｅａｒｔｉｆｉｃｉａｌｃｏｍｐｌｅｔｅａｎｔｉｇｅｎｗａｓｓｕｃｃｅｓｓｆｕｌ