二价金属离子影响乳酸脱氢酶活性的单扫伏安研究3.PDF

V o l. 19 高 等 学 校 化 学 学 报 N o. 4　 1 9 9 8 年 4 月 　　 　　　 CH EM ICAL JOU RN AL O F CH IN E SE U N IV ER S IT IE S　　　　　 543～ 546　 二价金属离子影响乳酸脱氢酶活性的单扫伏安研究 汪勋清　高小霞 (北京大学化学系, 北京, 10087 1) 摘要　探讨了 5 种二价金属离子(Zn2+ , Cu2+ , M n2+ , Ca2+ , M g2+ ) 对乳酸脱氢酶(LDH ) 在辅酶 存在下转化丙酮酸为乳酸催化体系的影响, 结果表明, 2+ 、 2+ 对 活性无影响, N ADH Zn Ca LDH 2+ 有抑制作用, 而 2+ 、 2+ 在低浓度时有微弱的促进作用. 从 2+ 与辅酶、酶的三元配合 M n Cu M g Zn 物的模型可以看出, 是一非金属酶, 2+ 不起催化作用. 对 2+ 、 2+ 、 2+ 、 2+ 的不 LDH Zn Cu M g Ca M n 同影响作了初步解释. 关键词　乳酸脱氢酶, 二价金属离子, 催化, 单扫伏安法 分类号　 657. 14 O 乳酸脱氢酶( . 1. 1. 1. 27) 在辅酶 存在下催化丙酮酸转化为乳酸, 其酶促 LD H EC N A D H 反应机理已有不少报道. 前文[ 1, 2 ] 指出三价稀土离子在此催化体系中对乳酸脱氢酶活性起抑 制作用. 本文研究 5 种二价金属离子(Zn2+ , Cu2+ , M n 2+ , Ca2+ , M g2+ ) 对LD H 活性的影响, 并根据实验现象和有关文献报道来解释 Zn 2+ 和 Ca2+ 无影响, M n 2+ 有抑制作用以及 Cu2+ 、 M g2+ 在低浓度时有微弱促进作用的机制. 1　实验部分 11　仪器与试剂 270 电化学系统, 303 静汞滴电极, 丝电极为辅助电极, 电极为参比 PA R M P t A g A gC l 电极. 实验溶液用高纯氮除氧 6 m in 后作单扫伏安扫描. C S50 1 型恒温槽, pH S3 型酸度计. N A D H ( 100% ) 和N A D ( 100% ) 为德国Bo eh r in ger M annh eim 公司产品, LD H (2 500 U ) 为美国 公司产品, 2、 2、 2 ·6 2 、 2 ·4 2 和 4 ·5 2 m g Sigm a CuC l ZnC l M gC l H O M nC l H O Cu SO H O 为分析纯试剂, 用石英蒸馏水于无锌容量瓶中配成 10 ×10- 3 溶液. 缓冲溶液 005 m o l L