复合靶指数富集配基系统进化技术研究进展.PDFVIP

２０１８年１０月 Ｖｏｌ．３６ Ｎｏ．１０ Ｏｃｔｏｂｅｒ ２０１８ ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ ９４７～９５１ 专论与综述 ＤＯＩ：１０．３７２４／ ＳＰ．Ｊ．１１２３．２０１８．０５０１９ 复合靶指数富集的配基系统进化技术研究进展 武振宁，　 薛书江，　 杨咏洁∗ （延边大学农学院，吉林 延吉 １３３００２） 摘要：核酸适配体是一类具有高度特异性和亲和力的单链寡核苷酸，被誉为“人工单抗”，具有广阔的应用前景。 它 一般是通过指数富集的配基系统进化（ＳＥＬＥＸ）技术筛选获得。 目前ＳＥＬＥＸ技术多局限于单一、纯化的可溶性蛋 白质靶标。 然而，蛋白质的纯化过程繁琐，耗时费力，而且很多靶标（如血清中的低丰度蛋白质或细胞的膜蛋白）很 难纯化获得单一纯品。 复合靶ＳＥＬＥＸ技术则可以避免靶标的纯化过程，能够保持靶标的天然构象，并且可以在未 明确靶标的组成及结构特性的前提下，通过高通量的盲筛获得一系列特异性核酸适配体。 该文主要介绍以未纯化 的各种生物样本为复合靶的ＳＥＬＥＸ技术，以期为核酸适配体的筛选提供新思路。 关键词：复合靶；核酸适配体；指数富集的配基系统进化；筛选；综述 中图分类号：Ｏ６５８　 　 　 文献标识码：Ａ　 　 　 文章编号：１０００⁃８７１３（２０１８）１０⁃０９４７⁃０５ Ａｄｖａｎｃｅｍｅｎｔｓ ｉｎ ｃｏｍｐｌｅｘ ｔａｒｇｅｔ ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃ ｅｖｏｌｕｔｉｏｎ ｏｆ ｌｉｇａｎｄｓ ｂｙ ｅｘｐｏｎｅｎｔｉａｌ ｅｎｒｉｃｈｍｅｎｔ ＷＵ Ｚｈｅｎｎｉｎｇ，ＸＵＥ Ｓｈｕｊｉａｎｇ，ＹＡＮＧＹｏｎｇｊｉｅ∗ （Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｙａｎｂｉａｎ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｙａｎｊｉ １３３００２，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｎｕｃｌｅｉｃ ａｃｉｄ ａｐｔａｍｅｒｓ ａｒｅ ｓｉｎｇｌｅ⁃ｓｔｒａｎｄｅｄ ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｓ ｔｈａｔ ｐｏｓｓｅｓｓ ｈｉｇｈ ａｆｆｉｎｉｔｙ ａｎｄ ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ． Ｔｈｅｙ ａｒｅ ａｌｓｏ ｋｎｏｗｎ ａｓ “ｃｈｅｍｉｃａｌ ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ” ａｎｄ ｈａｖｅ ａ ｗｉｄｅ ｒａｎｇｅ ｏｆ ａｐｐｌｉ⁃ ｃａｔｉｏｎｓ． Ａｐｔａｍｅｒｓａｒｅｕｓｕａｌｌｙｇｅｎｅｒａｔｅｄｂｙａｎｉｎｖｉｔｒｏｐｒｏｃｅｓｓｔｅｒｍｅｄａｓｓｙｓｔｅｍａｔｉｃｅｖｏｌｕｔｉｏｎｏｆ ｌｉｇａｎｄｓ ｂｙ ｅｘｐｏｎｅｎｔｉａｌ ｅｎｒｉｃｈｍｅｎｔ （ＳＥＬＥＸ）．Ａｐｔａｍｅｒｓａｒｅｏｆｔｅｎｓｅｌｅｃｔｅｄｂｙ ｅｍｐｌｏｙｉｎｇｐｕｒｉｆｉｅｄ ｓｏｌｕｂｌｅｐｒｏｔｅｉｎｔａｒｇｅｔｓ．Ｈｏｗｅｖｅｒ，ｔｈｅｐｒｏｃｅｓｓｏｆｐｒｏｔｅｉｎｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｃａｎｂｅｃｏｍｐｌｅｘａｎｄｌａｂｏｒｉ⁃ ｏｕｓ．Ｆｕｒｔｈｅｒｍｏｒｅ，ｓｅｖｅｒａｌｐｒｏｔｅｉｎｔａｒｇｅｔｓ，ｓｕｃｈａｓｌｏｗａｂｕｎｄａｎｃｅｐｒｏｔｅｉｎｓｆｏｕｎｄｉｎｓｅｒｕｍｓａｎｄ ｍｅｍｂｒａｎｅｐｒｏｔｅｉｎｓ ｆｏｕｎｄ ｉｎ ｃｅｌｌｓ，ａｒｅ ｄｉｆｆｉｃｕｌｔ ｔｏ ｐｕｒｉｆｙ． Ｃｏｍｐｌｅｘ ｔａｒｇｅｔ ＳＥＬＥＸ ｃａｎ ａｖｏｉｄ ｔｈｅ ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｓｔｅｐ ａｎｄ ｍａｉｎｔａｉｎ ｔｈｅ ｎａｔｉｖｅ ｓｔａｔｅ ｏｆ ｔｈｅ ｔａｒｇｅｔ ｐｒｏｔｅｉｎｓ． Ｅｖｅｎ ｉｎ ｔｈｅ ａｂｓｅｎｃｅ ｏｆ ｄｅｔａｉｌｅｄ ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎ ａｎｄ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ａ ｃｏｍｐｌｅｘ ｔａｒｇ