第4章细胞培养.ppt

* * 鸡胚胎成纤维细胞的传代培养（续） 4. 吸出消化液，加入适量的含小牛血清的培养液，反复轻轻吹打培养瓶底部，使经消化的细胞脱离瓶底并分散为单个细胞； 5. 收集细胞悬液， 1000 rpm离心5 min，弃上清； 6. 用培养液重新悬浮细胞并计算细胞活力和密度，以5×105个/mL密度（1：3）接种到培养瓶中，于38.5℃、5% CO2浓度、饱和湿度条件下培养。 4.4 细胞系和细胞株的建立 细胞系和细胞株的种类 原代培养 细胞系 克隆细胞株 二倍体细胞 遗传缺陷细胞 肿瘤细胞系或株  从一个经过生物学鉴定的细胞系用单细胞分离培养或通过筛选的方法，由单细胞增殖形成的细胞群，称细胞株。再由原细胞株进一步分离培养出与原株性状不同的细胞群，亦可称之为亚株（Substrain） 细胞株 细胞系 正常细胞培养的世代数有限，只有癌细胞和发生转化的细胞才能无限生长下去。所谓转化即是指正常细胞在某种因子的作用下发生突变而具有癌性的细胞。目前世界上许多实验室所广泛传用的HeLa细胞系就是1951年从一位名叫Henrietta Lacks的妇女身上取下的宫颈癌细胞培养而成（宫颈癌上皮细胞）。此细胞系一直延用至今。 细胞系或细胞株的命名 HeLa：为供体患者的姓名（来源于宫颈癌）CHO：中国地鼠卵巢细胞（Chinese Hamster Ovary） 宫-743：宫颈癌上皮细胞，197