细胞内高能化合物磷酸.docVIP

细胞内高能化合物磷酸 细胞内高能化合物磷酸烯醇式丙酮酸(PEP)的磷酸基团把HPR激活。 Pep+Hpr 丙酮酸+P-Hpr Hpr--一种低分子量的可溶性Pr，结合在细胞膜上，具有高能磷酸载体的作用。 酶I--一种可溶性细胞质Pr (2) 糖被磷酸化后运入膜内: 膜外环境中的糖先与外膜表面的酶II结合结合，再被运到内膜表面。这时，糖被P-Hpr上的磷酸激活，通过酶II的作用把糖-磷酸释放到细胞内。 P-Hpr+糖 糖-P+Hpr (细胞外) (细胞内) 酶II--一种结合于细胞膜上的蛋白，它对底物具有特异性选择作用，因此细胞膜上可诱导出一系列与底物分子相应的酶II。 第四节 培养基 培养基是人工配制的，适合微生物生长繁殖或积累代谢产物用的营养基质。 为了研究微生物的生命活动规律和生产微生物制品，配好培养基是取重要的基础工作。一个好的培养基要能充分保证微生物生长繁殖和积累代谢产物，为此在配制培养基时，针对微生物的不同营养类型，满足其六大营养要素，且比例合适。别外要注意:培养基一旦配成，必须立即灭菌，否则很快引起杂菌丛生。 一、 选用和设计培养基的原则和方法 (一) 四条原则: 1、 明确目的: 在设计之前，首先要明确目的，如要培养何菌,获何产物,用于研究还是生产,作种子还是发酵,如果用于研究则不必过多计较成本，但必须明确使用目的，即作一般培养还是作精细的生理、代谢或遗传等用。对前者要求不高，对后者则要精细。如果用于工业生产中的种子，则要其营养成分丰富些，菌体生长快些，应要求较低的C/N，如果用于发酵，则C/N可高一些，便于积累代谢产物。 2、 营养协调: 通过菌体成分的分析知，在各种微生物的细胞中，不同成分或元素间有较稳定的比例，要根据不同的培养目的和不同种类的微生物，调节好各种营养成分的比例，尤其是C/N，C/N是指在微生物培养基中所含的碳源中碳原子的摩尔数与N源子的摩尔数之比。不能简单地理解为某碳源与氮源的重量之比，这是因为不同物质，其含C或N的量不一致。 3、 物理化学条件适宜: (1)PH:各类微生物都有其合适的生长PH范围，如细菌PH在7-8，放线菌在7.5-8.5, 酵母菌在3.8-6.0, 而霉菌在4.0-5.8间, 对具体微生物来说,都有特定的最适PH。 在微生物的生长繁殖过程中，由于代谢产物的生成，会改变原来的PH，因此会影响或杀死微生物，因此在配制培养基时应考虑到培养基的PH调节能力，那么怎样实现PH的自我调节呢,有两种方法: (1)采用加入磷酸缓冲液的方式: 通过调节K2HPO4和KHPO4两者之间的浓度比就可获得从PH6.0-7.6之间的一系列稳定的PH。如当两者为等摩尔浓度比时，PH可稳定在6.8，其原理如下: K2HPO4+HCI KH2PO4+Kcl KH2PO4+Kcl K2HPO4+H2O (2)采用加入CaCo3作备用碱的方式: CaCo3在水中的溶解度极低，加入培养基中，不会使PH升高，当微生物产酸时，就会被溶解，其原理如下: CO3-2 HCO3-1 H2CO3 CO2+H2O 4、 透压和Aw(水分活度) 渗透压过高或过低都不利于微生物的生长，过高造成质壁分离，过低造成细胞吸水膨胀。等渗溶液最适宜微生物的生长。微生物在长期的进化过程中，形成了一套高度适应渗透压的特性，尤其是通过体内大分子贮藏物的合成和分解方式来适应。 比渗透压更有生理意义的是aw(Water Acticity)。其含义为:在同温同压下，某溶液的蒸汽压P与纯水蒸汽压P0之比。也等于溶液的百分相对湿度(ERH) P ERH aw=-- = _____ P0 100 各种微生物生长繁殖所需aw一般在0.998-0.6之间。 5、 经济节约: 主要是指在生产实践中使用大量培养基时应遵循的原则，如果下功夫，这方面的潜力是极大的，大致可从这样几个方面考虑:以粗代精，以野代家，以废代好，以简代繁，以烃代粮，以纤代糖，以国代进。 (二) 四种方法: 1、 生态模拟: 在自然条件下，凡有微生物大量生长繁殖的地方，认为是具备微生物适应生长的条件。可据此利用生态模拟的方法，配制一些初级、天然培养基，如:用肉汤、鱼汁培养多种细菌;水果汁培养酵母;米糠培养霉菌，用米饭面包培养根霉;用肥土培养放线菌等。 2、 查阅文献:参阅文献中的现有资料、数据等。 3、 精心设计:借助优选法或正交试验工具。 4、 试验比较:小试---中试---生产。 二、培养基的种类: 培养基名目繁多，种类各异，为了便于系统化，对其进行分类。 (一) 按对培养基成分的了解程度分: 1、 天然培养基:利用一些天然材料制成的培养基，对其成分无法确定。如用肉汤、 芽汁等制成的。 适合作实验室用的基本培