培训班教材微生物部分.pptVIP

第五部分 食品微生物检测基础 第一章 食品分析概论 微生物是一群形体非常微小，肉眼看不到或很难看清它的个体的生物。比如中等大小的细菌，1000个叠加在一起只有句号那么大。想象一下每毫升腐败的牛奶中约有50亿个细菌，或者讲毎夸脱牛奶中细菌总数约为5千万，也就是一滴牛奶含有5千万细菌。 微生物种类多，分布广，有些微生物起着有益的作用，有些微生物起着有害的作用。微生物对于食品来说关系尤为密切，很多微生物可应用于食品制造，如制酒、醋、面包、泡菜以及制造菌体蛋白等。但是，有些微生物能引起食物变质败坏，即引起食品气味和组织结构发生不良变化；少数微生物能产生毒素，引起食物中毒或引起人、动植物病害。 微生物除了具有其他生物共同具有的特性，如遗传性和变异性以外，还具有以下一些特性： 个体微小，结构简单。 分布广，种类多。 繁殖快，数量大。 易于变异，适应力强。 易于培养，代谢活力强。 第二节 食品微生物检测所涉及的类群 冰箱： 0～4℃ 恒温培养箱：36±1 ℃ 恒温水浴锅：46±1 ℃ 均质器或灭菌乳钵 药物架盘天平：0 ～500g，精确至0.5g 放大镜 4× 灭菌吸管：1mL、10mL 灭菌锥形瓶：500mL 灭菌培养皿：直径90mm 灭菌试管、玻璃珠、刀、剪子、镊子等 检样稀释及培养 霉菌和酵母菌计数 实验分析及结果判定 检验稀释 初发酵试验 复发酵试验 报告 实验分析及结果判定 培养基的制备 洗涤 灭菌前的准备 ㈢灭菌 玻璃器皿经干热或温热灭菌后备用。 微生物培养基的制备程序 配制 调整PH值 过滤 干热灭菌 湿热灭菌法 防止病原微生物扩散 安全清洁 谢谢！ 祝各位愉快！ ㈢载玻片和盖玻片的洗涤 新载玻片和盖玻片先在2%的盐酸中浸1h，然后用自来水冲洗，必要时可在重铬酸钾洗涤液中浸泡几个小时或在稀重铬酸钾洗涤液中煮沸半小时，然后取出用水冲洗。用过的载玻片上如沾有油脂，先用皱纹纸擦去，然后放入5%的肥皂水中煮沸10min或在酒精碱溶液中浸泡30min后再用自来水冲洗。洗后的载玻片再在稀的重铬酸钾洗液内浸2h，取出，用自来水冲洗到无色为止，最后用蒸馏水冲洗数次，烘干或浸于95%的酒精中备用。供细菌鞭毛染色用的载玻片，尤须保证洁净无伤痕。其洗涤方法是先用无渣粒的洗涤剂溶液煮沸，冷后用清水冲洗，再放入浓洗液中浸泡24h，取出后用清水冲洗，再用蒸馏水洗净，沥干，浸于95%的酒精中备用。 为了防止空气中的杂菌对灭过菌的培养基或器皿再次污染，必须在盛有培养基的器皿口上塞上棉塞。培养用的器皿以及其他用具都应包扎后灭菌。 ㈠ 制作棉塞 制作棉塞用的棉花，用市售的普通棉花即可，不宜用脱脂棉。因为脱脂棉容易吸收水而导致污染。棉塞应按器皿口径大小制作，其长度就试管而言，一般长约4～5厘米。常用的制作方法有：取适量棉花铺成长方形，纵向松松卷起来再对折后塞入管口；或将棉花铺成方形，于其中央衬以小块棉花，用左手拇指为中心制成棉芯，再由外侧棉花包入做成棉塞。棉塞制成后，将其2/3塞入容器内，1/3露在容器外，要求松紧适当，紧贴管壁不留缝隙。以手提棉塞试管不滑落为度。 ㈡ 包扎器皿 微生物分析用的培养皿和吸管等应事先包装后在灭菌。吸管应在管口约0.5厘米以下的地方塞入少许长约1.5厘米的棉花，以防止菌液吸入口中或口中细菌吹入管内。棉花的松紧程度以吹气时通气顺畅而不致下滑为准。然后，将吸管尖端放在4～5厘米宽的长条纸的一端约与纸成45度角，折叠纸条，包住吸管尖端，然后将吸管卷入纸条内，末端剩余纸条折叠打结，待灭菌。培养皿可按8或10套为一叠用纸包装，或装在特制的铝制筒内灭菌。 第一节 微生物培养基的制备 称取营养成分→加热溶化→调整PH值→煮沸 无菌检验←灭菌←分装←过滤 ㈠根据所培养的微生物对营养元素的要求选择适当的配方。 ㈡确定所需培养基的用量后，按配方称取药品和其它原料（一般用1/100感量的天平即可），逐一加入水中加热溶解。 ㈢最好先加无机药品，后加有机药品。难溶解的物质可先分别溶解后再加入。 ㈣易受高温破坏的药品应单独配制，采用过滤灭菌，临用前加入培养基中。 ㈤若制备固体或半固体培养基，则需加入琼脂（固体培养基加1.8～2.0%的琼脂，半固体培养基加0.8～1.0%的琼脂），加热至琼脂融化，并补足蒸发失去的水分。琼脂加入后宜开锅搅拌，以防糊防溢。 各种培养基因成分不同，配制以后其酸度不一样。 由于不同种类的微生物对培养基酸度的要求不同，因此，在配置培养基时应根据欲培养的微生物对酸度的要求待配方中各成分全部溶解后，测试并调整培养基的PH值。 常用的方法如下： ㈠试纸法 用PH试纸检测。用0.1NNaOH或乳酸调节培养基的酸碱度。 ㈡酸度计法 用酸或碱调节培养基酸度后，用酸度计