人参总皂苷TSPG联合EPO对白血病细胞KG1α增殖的影响.docVIP

[基金项目]国家自然科学基金面上项目31271368)重庆市教委基金项目(KJ110328) [通信作者]李 静，电话：（023E-mail： HYPERLINK mailto:lijingjj@ lijingjj@ [优先出版] HYPERLINK /kcms/detail/51.1095.R0846.012.html /kcms/detail/51.1095.R0846.012.html（2014-09-18） 人参总皂苷TSPG联合EPO对白血病细胞KG1α增殖的影响 李丹阳，夏 菁，冯子强, 石庆强，游智梅，刘泽洪，陈地龙，李 静 (400016重庆，重庆医科大学基础医学院组织学与胚胎学教研室，干细胞与组织工程研究室) [摘要] 目的 探讨人参总皂苷TSPG单独或联合人促红细胞生成素（EPO）对人白血病细胞KG1-α增殖的影响及机制探讨。方法 体外培养KG1-α细胞，选取处于对数生长期的细胞用于实验。空白对照组予以常规培养；人参总皂苷TSPG组分别加入25、50、100、200、400 mg/L TSPG；人参总皂苷+EPO组加入上述等量TSPG，同时加入0.5U/L EPO，并设置EPO对照组。培养3、7、14 d后用CCK-8法检测TSPG单独或联合EPO对KG1-α细胞增殖的影响；运用Real-time PCR技术检测EPOR、STAT5、JAK2、AKT等EPO/EPOR通路相关基因的表达。用Western blot检测Bcl-2、Bax、Cleaved Caspases-3、P53、P16等蛋白的表达，EPOR蛋白的表达及其活性。结果 人参总皂苷TSPG在体外能明显抑制KG1-α细胞的增殖，100μmol/L为最适作用浓度，7 d为最适作用时间，如果在EPO存在的条件下，其最适浓度则降低到75 mg/L；与对照组相比，在EPO存在的条件下人参总皂苷TSPG诱导可明显使细胞阻滞于G0/G1期，若不使用EPO则TSPG对细胞周期无影响；Real-time PCR检测结果显示TSPG诱导组KG1-α细胞内EPOR、Jak2、STAT5等由EPOR介导的JAK-STAT通路相关基因的表达均随TSPG浓度增加而降低，其中高浓度具有明显差异（P0.05）；Western blot检测经单独使用TSPG处理了7 d的KG1-α细胞，与对照组相比，其EPOR及P-EPOR表达明显下调，Jak2、STAT5、p-STAT5、Bcl-2蛋白表达下调，而Bax、Cleaved Caspases-3表达增高，P53及P16无变化；然而添加了EPO处理的各组p-EPOR、Jak2、p-STAT5、P53及P16的表达明显增加，Bcl-2、Bax、Cleaved Caspases-3的表达没有变化。结论 TSPG能下调细胞内由EPOR介导的JAK-STAT通路相关蛋白的表达，并降低EPOR的活性，进而下调Bcl-2、上调Bax和Cleaved Caspases-3来促进细胞凋亡；而添加了EPO后这种作用被拮抗，抑制细胞增殖的作用是通过上调P53及P16促进细胞衰老而产生的。 [关键词] 人参总皂苷；KG1-α细胞；促红细胞生成素；细胞凋亡；细胞衰老 [中图法分类号] [文献标志码] A Effect of total saponins of panax ginseng combined with erythropoietin on proliferation in leukemia KG1-αcells Li Danyang, Xia Jing, Feng Ziqiang, Shi Qingqiang, You Zhimei, Liu Zehong, Chen Dilong, Li Jing (Department of Histology and Embryology, Laboratory of Stem Cell and Tissue Engineering, College of Basic Medical Sciences, Chongqing Medical University, Chongqing, 400016, China) [Abstract] Objective To determine the effect of total saponins of panax ginseng (TSPG) separately or jointly with erythropoietin (EPO) on the proliferation of human leuke