第八章吸光光度分析..pptVIP

与721型相比，722型分光光度计的测量精度有所提高。这里仅介绍一下其功能和操作方面与721型不同之处。 读数精度的校准 透射比和吸光度的测量 浓度c的测量 8.3.3 722型分光光度计 8.3.4 754C型紫外-可见分光光度计 8.3.4.1 结构特点 图8-8 8.3.4 754C型紫外-可见分光光度计 图8-9 8.3.4.2 操作步骤 开机 打开样品室盖 选择光源 选择波长 调节波长旋钮，选择需用的单色光波长 调零调百 测试 关机 8.3.4 754C型紫外-可见分光光度计 8.3.5 光度测量条件的选择 8.3.5.1 测定波长 在紫外光区根据被测物质的吸收曲线，在可见光区根据显色溶液的吸收曲线，一般选择最大吸收波长(λmax)作为测定波长。如果干扰物质(包括显色剂)在此波长也有吸收，那么可选择灵敏度稍低的另一波长进行测定。但要尽可能选择吸收曲线较平滑的部分，以保证测定的精密度。 8.3.5.2 空白溶液 空白溶液又叫参比溶液，用于调节吸光度零点(T＝100%)。 8.3.5 光度测量条件的选择 8.3.5.3 读数范围 由721型分光光度计显示电表的标尺可以看到，被测溶液吸光度值太小或太大都会影响测量的准确度。在标尺右端，吸光度太小，测量的相对误差必然很大；在标尺左端，吸光度刻度很密，难以读准。因此应创造条件使吸光度读数适中，最好控制吸光度读数范围为0-2～0-8。通过调整溶液的浓度或选择适当厚度的吸收池，可使吸光度读数落在适宜的范围内。 8.3.5 光度测量条件的选择 8.4 定量分析方法 1 2 目视比色法 标准曲线法 3 标准对照法 8.4.1 目视比色法 目视比色法是用眼睛观察溶液颜色深浅来测定物质含量的方法。 目视标准系列法所用的仪器是一组以同样材料制成的、形状大小相同的平底玻璃管，称为比色管。 目视比色的主要缺点是准确度不高，因为人的眼睛对不同颜色及其深度的分辨率不同，会产生较大的主观误差。但由于这种方法仪器简单、操作方便，目前仍应用于准确度要求不很高的例行分析中。 8.4.2 标准曲线法 根据光吸收定律，当波长一定的入射光通过液层厚度一定的吸光物质溶液时，吸光度与溶液中吸光物质的浓度成正比。若以吸光度对浓度作图，应得到一条直线。 8.4.2 标准曲线法 图8-10 8.4.2 标准曲线法 图8-11 8.4.2 标准曲线法 8.4.3 标准对照法 标准对照法又称比较法，其实质是一种简化的标准曲线法。 Thank you 化工分析 化工分析 显色反应及其应用 2 分光光度计及其操作 3 物质对光的选择性吸收 1 第八章 吸光光度分析 定量分析方法 4 8.1 物质对光的选择性吸收 1 2 光吸收的本质 光吸收曲线 3 光吸收定律 8.1.1 光吸收的本质 光是一类电磁辐射，属于电磁波领域内的能量传播。光具有一定的波长和频率。 一定波长的光称为单色光。由不同波长的光复合而成的光称为复合光。 8.1.2 光吸收曲线 精确地描述某种物质的溶液对不同波长光的选择吸收情况，可以通过实验测绘光吸收曲线。为此，用不同波长的单色光照射一定浓度的吸光物质的溶液，测量该溶液对各单色光的吸收程度(即吸光度A)。 8.1.2 光吸收曲线 图8-1 8.1.3 光吸收定律 当单色光通过含有吸光物质的稀的、均匀溶液时，由于溶液吸收了一部分光，光通量就要减小。 8.1.3 光吸收定律 图8-2 在分光光度法中还经常以透射比倒数的对数表示溶液对光的吸收程度，称为吸光度，用A表示。 8.1.3 光吸收定律 光的吸收定律，称为朗伯-比尔定律 8.1.3 光吸收定律 8.2 显色反应及其应用 1 2 显色剂的选择 显色反应条件 3 应用实例 8.2.1 显色剂的选择 与待测组分形成有色化合物的试剂叫做显色剂。在选择显色反应和显色剂时，应尽量满足下列要求： 灵敏度高。 选择性好。 有色化合物组成恒定、化学性质稳定。 有色化合物和显色剂之间的颜色有较大的差别。 显色反应条件易于控制。 显色剂可分为无机显色剂和有机显色剂两大类 无机显色剂 有机显色剂 利用两种试剂与待测物质形成三元配合物的显色反应(三元配合物是指由三个组分形成的配合物)，选择性与灵敏度都好。 8.2.1 显色剂的选择 8.2.2 显色反应条件 8.2.2.1 显色剂用量 显色剂的适宜用量可通过实验来确定，其方法是将待测组分浓度及其他条件固定