骨形态发生蛋白-7对肝星状细胞转化生长因子β信号转导的影响.docVIP

骨形态发生蛋白-7对肝星状细胞转化生长因子β信号转导的影响 武鹏宇，戴立里，唐 静，呙琳琳（400010 重庆，重庆医科大学附属第二医院消化内科） [摘要] 目的 通过体外细胞实验，观察骨形态发生蛋白-7（BMP-7）对转化生长因子β1（TGFβ1）处理的肝星状细胞（HSC）增殖，活化及TGFβ信号转导的影响，探索BMP-7抗肝纤维化的机制。方法 以不同浓度（80、40、20 ng/ml）BMP-7及TGFβ1（5 ng/ml）处理的人肝星状细胞LX-2，CCK8法检测LX-2增殖，免疫化学染色法观察α-平滑肌动蛋白（α-SMA）与Ⅰ型胶原的表达，RT-PCR检测TGFβⅠ、Ⅱ型受体mRNA，Smad3、7 mRNA的表达。结果 经TGFβ1刺激后，LX-2增殖能力无明显改变，BMP-7（20～80 ng/ml）处理后，各组LX-2细胞增殖均被抑制，高浓度时抑制更强（P 0.01）。TGFβ1可促进LX-2表达α-SMA 和I型胶原，加入BMP-7（20～80 ng/ml）处理48 h后可抑制细胞活化和胶原表达，抑制作用随处理浓度增强而增强（P 0.01, P 0.05）。5 ng/ml TGFβ1处理48 h后，TβRⅠ、TβRⅡ、Smad3 mRNA表达增加，Smad7 mRNA表达减少。BMP-7可减少Smad3 mRNA表达（P 0.01），增加Smad7 mRNA表达（P 0.01, P 0.05），但对TβR mRNA的表达影响无统计学意义(P 0.05)。结论 BMP-7可抑制肝星状细胞的增殖和活化，减少I型胶原的表达，其机制可能为抑制TGFβ/Smad通路中Smad3 mRNA表达，增加Smad7 mRNA表达，从而拮抗TGFβ1的促纤维化作用。 [关键词] 肝硬化肝纤维化；肝星状细胞；骨形态发生蛋白质类骨形态发生蛋白；转化生长因子 [中图分类号] R575.2；R285.5 [文献标志码] A Effects of Bone Morphogenetic Protein-7 on Transforming Growth Factor β Signaling in Hepatic Stellate Cells Wu Pengyu, Dai Lili, Tang Jing, Guo Linlin （Department of Gastroenterology, Second Affiliated Hospital of Chongqing Medical University, Chongqing，400010,China） [Abstract] Objective To investigate the effects of bone morphogenetic protein-7 (BMP-7) on proliferation, activation and TGFβsignaling in TGFβ1inducing hepatic stellate cells, and the possible mechanism of anti-fibrosis. Methods Human HSC LX-2 cell line treated with different concentration of BMP-7（80 ng/ml，40 ng/ml，20 ng/ml）and TGFβ1（5 ng/ml）was measured by Cell Counting Kit-8 as the impact of cell proliferation. The expressions of α-smooth muscle actin (α-SMA) and collagen I were detected by the immunocytochemical assay . The expressions of TGF receptor I, II (TGFβRI, TGFβRII) mRNAs, and Smad 3, 7 mRNAs were measured by RT-PCR. Results The proliferation of LX-2 treated by TGFβ1 was not significant different from the control group, while BMP-7 inhibited the proliferation of LX-2 in a dose-dependent manner (P 0.01). TGFβ1 increased expressions ofα-SMA and collagen I, and BMP-7