细菌形态学检查法.PPT

细菌形态学检查 细菌的显微镜检查 显微镜：光学显微镜 所用放大倍数：10×100＝1000 所用镜头：油镜头 镜油：香柏油或石蜡油 香柏油折光率（n＝1.515）与玻片折光率（n＝1.52）接近 显微镜使用完毕须擦拭镜头。 不染色标本检查 应用：主要用于观察活菌的动力和运动方式 常用方法：压滴法、悬滴法、暗视野映光法 压滴法 悬滴法 染色标本的检查 染色方法的种类 单染法:采用一种染料染色 复染法（鉴别染色）:采用两种或两种以上的不同染料进行先后染色，使不同种类的细菌、同种细菌的不同结构，分别染上不同的颜色，以便鉴别细菌。 染色标本检查的基本程序 涂片－→干燥－→固定－→染色 ★涂片方式 ★干燥的方法 ★固定的方法、目的 ★染料种类：碱性染料、酸性染料、中性染料，碱性染料最常用 复染法基本程序 初染－→媒染－→脱色－→复染 革兰染色法（Gram染色） 染液组成： 结晶紫染液、卢戈碘液、95％乙醇、稀释复红 染色方法： 革兰染色结果 紫色－－革兰阳性菌 红色－－革兰阴性菌 染色结果图 染色原理 ★渗透学说：与肽聚糖结构有关 ★化学学说：与细菌细胞质中核糖核酸镁盐有关 ★等电点学说：与细菌所带电荷有关 革兰染色意义 ★有助于鉴别细菌 ★有助于选择用药 ★有助于了解细菌的致病性 影响革兰染色的因素 操作因素 ★涂片的厚薄 ★脱色时间的长短 染液因素 ★卢戈碘液放置时间过长 ★ 95％乙醇挥发 ★结晶紫与草酸铵混合时间太长 细菌因素： ★细菌种类、 ★细菌菌龄 抗酸染色 用于区别抗酸菌与非抗酸菌 细菌特殊染色 负染色法 * * 载玻片 细菌悬液 盖玻片 镜检 结晶紫 初染 卢戈碘液 媒染 95％乙醇 脱色 稀释复红 复染 1分钟 30S～1min 1分钟 影响革兰染色的关键步骤是脱色 革兰阳性菌 革兰阴性菌