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齐墩果酸对肝癌细胞Hep3B增殖和凋亡的作用研究
黄开顺1,朱链链2,刘丹2,邹黎2, 雷琪2, 葛蹼2,陈志琼1,2*
(重庆医科大学 1.生命科学研究院;2.药学院 药物分析教研室;3.基础医学院 病理生理教研室, 重庆 400016)
摘要 目的 研究齐墩果酸对人肝癌细胞株Hep3B增殖的影响及其凋亡与细胞内钙离子浓度([Ca2+]i)关系。方法 不同浓度齐墩果酸作用于肝癌Hep3B细胞以后,DAPI染色,以荧光显微镜观察细胞形态变化;用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测Hep3B细胞增殖情况;流式细胞仪检测细胞周期改变、细胞凋亡率和细胞内钙离子浓度;对钙离子荧光强度与细胞凋亡率之间进行相关性分析。结果 细胞凋亡发生;不同浓度齐墩果酸能够抑制Hep3B细胞株增殖,且在5~100μg/mL范围内呈剂量依赖性,药物作用细胞24、48h的IC50分别为86.04 、93.29μg/mL;各处理组细胞周期在G2/M期产生阻滞、([Ca2+]i)较对照组显著增加,细胞凋亡率和[Ca2+]i增加与药物浓度存依赖关系;钙离子荧光强度与细胞凋亡率之间存在线形相关性。结论 齐墩果酸能够抑制肝癌Hep3B细胞株增殖,并可能通过上调[Ca2+]i诱导其凋亡。
关键词: 齐墩果酸;肝癌细胞Hep3B;细胞周期;细胞凋亡;细胞内钙离子浓度
中图分类号R282.75 文献标志码 A
Effects of Oleanolic Acid on Proliferation and Apoptosis of Hepatoma Cell Line Hep3B
Huang Kai-shun1 ,Zhu Lian-lian2,Liu Dan2,Zou Li2,Ge Pu3,lei Qi2,Chen Zhi-qiong1,2*
(1.Institute of Life Sciences;2.Department of Pharmacy Analysis , School of Pharmacy ;3. Department of Pathophysiology, School of Basic Medicine, Chongqing Medical University,Chongqing 400016)
Abstract :Objective To investigate the influence of oleanolic acid on the proliferation of human hepatoma Hep3B cell and the relationship between apoptosis of Hep3B cell and intracellular Ca2+ concentration([Ca2+]i). Methods Hep3B cells were treated with oleanolic acid of different concentrations and stained with DAPI , morphology changes were observed by fluorescence microscopy; growth inhibition ratioes were measured by the MTT method;Cell cycle , percentages of apoposis and intracellular Ca2+ concentrations([Ca2+]i) were checked by flow cytometry;Linear correlation was analized between [Ca2+]i and the percentage of apoposis Results The apoptosis of Hep3B cell occurred;Oleanolic acid of different concentrations inhibited the proliferation of Hep3B cells in a dose dependent manner from 5 μg /mL to 100 μg /mL ,with IC50 being 86.04 μg/mL and 93.29 μg/mL for 24 h and 48 h, respectively. Cell cycle was terminated at G2/M phase by oleanolic acid and intracellular calcium ion concentration was significantly increased,
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