纳米银离子对铜绿假单胞菌生物膜的细菌死亡率的影响.docVIP

PAGE PAGE 1 纳米银离子对铜绿假单胞菌生物膜的细菌死亡率的影响 邹志慧，余加林基金项目：国家自然科学基金；重庆市科委自然科学基金(2007BB5282) Supported by the National Natural Science Foundation of China 基金项目：国家自然科学基金；重庆市科委自然科学基金(2007BB5282) Supported by the National Natural Science Foundation of China(3O772363)and the Natural Science Foundation of Scientific Committee of Chongqing (2007BB5282) 作者简介：邹志慧，男，江西省临川市人，硕士研究生，主要从事新生儿感染方面的研究。电话：E-mail:zzh975613@ 通信作者：余加林，电话：(0233531，E-mail：yujialin486@ 收稿日期：2008-12-26；修回日期：2009-02-15 摘 要： 目的 探讨纳米银离子对细菌生物膜（biofilm，BF）的细菌死亡率的影响。 方法 采用摇床法，以纳米银离子含量不同的乙烯-醋酸乙烯酯（Ethylene-Vinyl acetate， EVA）塑料为细菌粘附载体，模拟体内铜绿假单胞菌(P.aeruginosa,PA)BF形成的微环境，建立体外BF模型；将培养3 d的空白标本分别在扫描电子显微镜（SEM）下及用FITC-ConA染色后荧光显微镜下观察不含纳米银EVA中BF的形成情况；将生长0.5、1、2、3、5 d的BF模型行SYTO9∕PI染色，激光共聚焦扫描电镜（CLSM）下摄取不同层面的图像，然后采用Image Pro Plus 6.0分析软件分析不同干预条件下BF的细菌的死亡率。 结果 运用SEM及荧光显微镜的方法，在以不含纳米银EVA塑料为细菌粘附载体上培养3 d的标本中均观察到流线状的BF形成；纳米银离子含量、作用时间对BF的细菌死亡率均有明显影响（F值分别为84.62, 85.67，P 0.01）；不同时间点含有纳米银离子材料的BF细菌死亡率均显著高于空白对照组（P0.05），但纳米银离子含量不同的2种材料上BF的细菌死亡率无明显影响（P0.05）；纳米银离子含量不同的（0、0.05%、0.1%）材料上的BF，其第1、2、3天细菌死亡率均分别显著高于第0.5、5天的细菌死亡率（P0.05）；含纳米银离子0.1%的材料上BF在作用的第2天其细菌死亡率最高[（88.53±1.88）％]。 结论 运用摇床法成功建立了体外BF模型，纳米银离子对BF内的细菌有明显杀灭作用。 关键词：细菌生物膜；纳米银离子；模型 中图法分类号： 文献标识码：A Silver nanoparticles on the role of bacterialcide mortality of P. aeruginosa in in vitro biofilms ZOU Zhi－-hui, YU Jia－-lin, LIU Guan-xin, LI Fang, LIN Li-hua, LIN Ya-yin (Department of Neonatology，, Children’’s Hospital，, Chongqing Medical University，, Chongqing 400014，, China) Abstract：: Objective To explore the bactericidal effect of silver nanoparticle onAnalysis of the bacteria mortality of P. aeruginosa in an in vitro model of biofilms in order to explore the effect of silver nanoparticle to the biofilm. Methods The ethylene-vinyl acetate (EVA) plastics inwith 0.01% or 0.05% different concentration of silver nanoparticle in it were used as carriers for the bacteria adhesion, on which bacterial biofilm models in vitro were built by using shaki