细胞因子诱导小鼠骨髓间充质干细胞跨越分化肝细胞的研究.PDFVIP

·728· ● 实验研究 细胞因子诱导小鼠骨髓间充质干细胞 跨越分化肝细胞的研究 董学君 陈烨 邵健忠 张国荣 项黎新 【摘要】 目的 探索骨髓问充质干细胞(MSCs)体外跨越分化为肝细胞的诱导体系。方法从 单核细胞中分离间充质干细胞，用添加20 HGF、10 FGF-4、10OSM和10％NBS ng／ml ng／ml ng／ml 的IMDM培养液诱导间充质干细胞向肝细胞分化。结果经细胞因子诱导的细胞出现肝细胞样变 化，随诱导时间延长体积逐渐增大、形态往上皮样转变，胞浆丰富，出现双核或多核细胞。RT—PCR和 免疫荧光检测结果显示，AFP在诱导初期表达，在诱导后期表达下降；CKl8、ALB和TAT的表达与 诱导时间呈线性关系。第20天达到表达高峰；诱导20d后免疫荧光检测，AFP、CKl8、ALB和TAT 均为阳性；诱导20 d细胞的PAS糖原合成反应呈阳性，即具备糖原合成和储存的肝细胞特有功能。 结论HGF、FGF-4和OSM三种细胞因子组合，可诱导小鼠问充质干细胞向肝细胞分化，该结果为 间充质干细胞跨越分化肝细胞的分子机制探讨和临床应用打下了基础。 【关键词】间充质干细胞； 肝细胞； 分化； 肝细胞生长因子{ 成纤维细胞生长因子一4； 制瘤素 Trans-differentiationof frommOllSebonemarrow stemcelIsinducedcombi- hepatocytes mesenchymaI by nation Hos- ofcytokines DONGXue-jUrl’，cHENYe，sHAoJian—zhong，etal．’Shaoxingpeople’s 312000，P．R．China pital，Shaoxing an for Toestablisheffectivemethod mousebonemarrowmesen— [Abstract]0bjective inducing stemcells(MSCs)into IsolatedMSCswereselected adher— chymal hepatocytes．Methods byplastic ence，differentiatedinIscove7SModifiedDulbeceo’smedium with10％newbovineser— supplemented um(NBS)，20 factor(HGF)，10fibroblastfactor-4(FGF二 ng／mLhepatocytegrowth ng／mL growth 4)and10 oncostatinm(OSM)for20 mediumwas 4 ng／ml days’induction．Thechangedeverydays． ResultsWhenMSCswereculturedwith HGF，FGF-4andOSM，euboidal wasa morphology，which characteristicof observed，andthedifferentiatedceilsalso marker hepatocytes，was expressedgenes tolivercellsina