一种从大熊猫粪便中提取DNA的改进方法CURRENTZOOLOGY.PDF

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2019-01-19 发布于天津
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一种从大熊猫粪便中提取DNA的改进方法CURRENTZOOLOGY

动物学报　49 (5) :670～674 , 2003 A cta Zoologica S inica 　　　　　　一种从大熊猫粪便中提取 D NA 的改进方法 ① ② ③ ① 钟　华　赖旭龙　魏荣平　刘中来 ( ①华中师范大学生命科学学院 , 武汉 430079) ( ②中国地质大学地球科学学院 , 武汉 430074) ( ③中国保护大熊猫研究中心 , 四川卧龙 623006) 摘　要　本研究描述一个改进的方法 , 使从大熊猫粪便中提取 DNA 用于 PCR 扩增变得更加容易。在粪便 DNA 的提取过程中采用一个新的预处理方法 , 将粪便用预冷的丙酮洗 2 ～3 次 , 除去粪便中含有的大量 PCR 抑制物 , 然后用蛋白酶 K 裂解、酚 - 氯仿抽提 , 能提取到纯度很高的 DNA 供 PCR 扩增。本实验 PCR 扩增了大熊猫脑源 ( ) 性神经营养因子 BDNF 基因和线粒体细胞色素 b 基因片段 , 并进行测序分析 , 证实了提取的可靠性。对比本方法和未经丙酮预处理的方法提取的 DNA 进行 PCR 扩增 , 前者的扩增结果明显优于后者 [ 动物学报 49 ( 5) : 670～674 , 2003 ] 。关键词　大熊猫　粪便 DNA 　丙酮　DNA 抽提　非损伤性取样 An improved protocol for D NA extraction from the faeces of the giant panda ① ② ③ ① ZHON G Hua 　LAI XuLong 　WEI RongPing 　L IU ZhongLai ( ) ① College of L if e Science , Cent ral Chi na Normal U niversity , W uhan 　430079 , Chi na ( ) ② Faculty of Earth Sciences , Chi na U niversity of Geosciences , W uhan 　430074 , Chi na (