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第六节 水稻育种的途径和方法（三）---诱变育种和花药培养技术 一、诱变育种 我国水稻诱变育成的品种年种植面积约占全国水稻种植面积的1/10。种植面积的品种有原丰早（来自IR8早熟诱变）、浙辐802，皆为长江中下游早稻主栽品种。;水稻诱变育种仍以γ射线为主，占80%； 其次为快中子（6%）、 激光（4%）。 另外还有β射线、微波、化学诱变剂、电子流、离子束。;（一）诱变处理方法 1. 适宜照射剂量：在一定的照射剂量范围内，突变率与照射剂量呈正相关，但照射的损伤效应也相应提高。目前广泛采用的是半致死剂量，即照射后植株成活率在50%左右，结实率在30%以下。60Coγ射线处理干种子所用的剂量范围为150-600Gy(1Gy=100R), 但以300Gy育成的品种数最多，约占58%。;籼稻和粳稻对辐射敏感性不同，籼稻抗辐射能力较强。 品种间及不同发育阶段的辐射敏感性相差也很大，可参考表1-6（P33）采用2~3个不同剂量处理。;表1-6 水稻辐射育种的适宜照射剂量;一般γ射线处理籼稻干种子采用300Gy的剂量，粳稻干种子为250Gy，剂量率为0.83-0.415Gy/min。 中子处理则以3×1011中子数/cm2左右为好。;如果以发芽种子或秧苗进行处理，剂量为干种子处理剂量的1/10-1/12左右。 处理种子数量视品种的辐射敏感性和诱变率，以及照射剂量的大小而不同，一般为100-250克，最低限度需要500粒。;2. 化学诱变及复合处理。P32。 化学诱变如用NMU（N-亚硝基-N-甲基尿烷）处理水稻干种子，据报告0.15%和0.03%的溶液浸渍6小时均有效。;九州大学佐藤光教授用MNU（N-methyl-N-nitrosourea)处理水稻受精卵引发突变改良稻米品质（略加介绍）。;;;;N-Methyl-N-Nitrosourea (MNU) treatment for fertilized egg cells of rice; 用射线与EMS复合处理水稻种子比单独处理的效果好。;（二）选育的方法 1.照射材料的选择: 通常选用有优良性状的品种或推广品种作为材料,以改良个别性状; 也有用杂种世代种子处理的, 以增加变异幅度.;2.M1代: 采用密植控制分蘖; 一般都不进行选择。只收主穗, 单存或混合脱粒. 为什么? 3.M2代: 种植穗行或株行; M2出现异常的叶绿素突变体较多，有育种利用价值的突变少，因此群体要足够大。;4.M3及以后世代：一般已很少分离，尤其是单基因突变体。M3代均以株系种植，如株系内性状已稳定，可以混合收获。;5.诱变与杂交相结合的选育：利用杂种一代或后代进行诱变处理， 提高其后代的变异类型。由于诱变处理不仅引起基因突变，也增加了染色体交换的频率，打断性状间的紧密连锁，实现基因重组，扩大了杂种后代变异类型，提高诱变效果。 6.诱变育种成功事例。见P33。;(三）一些性状改良的效果（想一想为什么？） 1.生育期的改良：选育早熟类型较有把握，尤其在大田容易鉴别。据报道，M2早熟突变体出现的频率为0.6%-2.3%。 实例：IR8 原丰早;2.植株高度的改良：将高秆品种诱发得半矮秆类型突变体的频率也较高（0.29%-0.42%）。 实例：陆财号　　辐射31 富士稔 黎明（日本） Calrose Calrose76 M7, M101, Calpearl (USA);3.稻米品质的改良：把粘性变为糯性；也可改良稻米蒸煮品质。 二九青 湘辐糯（湖南） IR8 糯稻RD6(四川宜宾) 红410 优质红突31(浙江舟山) 佐藤光实验室的工作。;;;4.抗病性的改良：可提高水稻抗瘟性（如桂朝2号 辐桂1号）。但据Yamasaki Kawai, （1968）报道，M2抗稻瘟病突变频率仅为0.006%。 5.突变体应用于杂交育种：利用突变体为杂交亲本选育品种，有许多成功事例，见P34。;二、花药（花粉）培养技术 花药培养和花粉培养的含义：在合成培养基上改变其正常的发育途径，由单个花粉粒发育成完整植物的技术。;花药培养和花粉培养的区别：外植体不同。用花粉就不会因花药的药壁、花丝、花隔等体细胞的干扰而形成体细胞植株。但花粉培养技术难度大。;花药培养和花粉培养的历史与成绩： 中花9号；浙粳66；合单76-085等。 说明已为水稻育种增添了一种有效的辅助技术。;（一）花药培养的一般操作程序：P35。 1. 取花粉发育处于单核中晚期(花药伸长达颖壳的1/3-1/2)的稻穗经低温(4-10度)处理。;2. 接种前进行表面灭菌。用75%的酒精擦洗；或用新鲜漂白粉饱和液的上清夜浸泡15分钟； 或用0.1%升汞（二氯化汞）浸泡10分钟。再用无菌水冲洗3次。;3. 在超净台上接种操作，每根直径3