试验五滴定法测定植物的呼吸强度.DOC

实验五 滴定法测定植物的呼吸强度 一、实验目的 掌握用广口瓶法测定植物的呼吸速率，并比较不同萌发阶段小麦种子及幼芽的呼吸速率。 二、实验原理 在密闭容器中加入一定量碱液[一般用Ba(OH)2]并悬挂新鲜植物材料，则植物材料呼吸放出的二氧化碳可为容器中Ba(OH)2吸收，然后用草酸滴定剩余的碱，从空白和样品二者消耗草酸溶液之差，可计算出呼吸释放的二氧化碳的量。其反应如下： 三、实验器材 广口瓶测呼吸装置(如实验图)、电子天平、酸式和碱式滴定管、滴定管架、温度计、尼龙网制小篮、1/44moL·L-1草酸溶液(准确称取重结晶H2C204·2H20 2.865ɡ溶于蒸馏水中，定容至l 000mL，每毫升相当于lmɡCO2)、0.05moL·L-1氢氧化钡溶液[Ba(OH)2 8.6ɡ或Ba(OH)2·8H20 15.78ɡ溶于l 000mL蒸馏水中。如有浑浊，待溶液澄清后使用]、酚酞指示剂(称取lg 四、实验步骤 (一)呼吸强度的测定 1. 装配广口瓶测呼吸装置 取500mL广口瓶1个，加一个三孔橡皮塞。一孔插入一装有碱石灰的干燥管，使吸收空气中的二氧化碳，保证在测定呼吸时进入呼吸瓶的空气中无二氧化碳；一孔插入温度计；另一孔直径约1cm，供滴定用。平时用一小橡皮塞塞紧。在瓶塞下面装一小钩，供装植物材料用。整个装置如下图。 2. 空白滴定 拔出滴定孔上的小橡皮塞、用碱滴定管向瓶内准确加入0.05moL·L-1Ba(OH)2溶液 20 mL，再把滴定孔塞紧。充分摇动广口瓶几分 图4.1 广口瓶测呼吸强度装置 钟。待瓶内二氧化碳全部被吸收后，拔出小橡皮塞加入酚酞3滴，把酸滴定管插入孔中，用l/44moL·L-1草酸进行空白滴定，至红色刚刚消失为止，记下草酸溶液用量(mL)，即为空白液滴定值。 3. 材料滴定值的测定 取另一广口瓶测呼吸装置，加20mLBa(OH)2溶液于瓶内，取待测小麦种子l00粒，同时称出重量，装入小筐中，打开橡皮塞，迅速挂于橡皮塞的小钩上，塞好塞子(加样操作时，应严格防止室内空气和口中呼出的气体进入瓶内)，开始记录时间。经30min，其间轻轻摇动数次，使溶液表面的BaC03薄膜破碎，有利于二氧化碳的充分吸收。到预定时间后，轻轻打开瓶塞，迅速取出小筐，立即重新塞紧。充分摇动2min，使瓶中二氧化碳完全被吸收，拔出小橡皮塞，加入酚酞3滴，用草酸滴定如前记下草酸用量，即为样品滴定值。 4. 取出广口瓶中的小麦种子，放于烘箱中于80℃ 5. 计算呼吸速率： 呼吸速率=（空白滴定值-样品滴定值）*mg CO2/ml草酸 呼吸速率的单位一般可采用mg·g·-1h-1,式中滴定值以毫升计，mgCO2·mL-1草酸=1。 (二)不同状态植物种子呼吸速率的比较 用前面描述过的大小一致的广口瓶3个(可三个实验小组合作)，按步骤3、4分别测定以下材料的呼吸速率： 吸胀的小麦种子100粒； 萌动的小麦种子100粒； 芽长0.5cm左右的小麦种子100粒。 根据测定结果，按上述实验式计算以鲜重(或干重)为单位的呼吸速率。并计算每100粒小麦种子lh内放出的二氧化碳毫克数。 呼吸速率测定记录表 处理 编号 处理方式 材料量 测定时间(min) 空白滴定植 (mL) 样品滴定植 (mL) 鲜重 干重 粒数 1 吸胀种子 2 萌动种子 3 芽长0.5cm种子 五、注意事项 实验课中由于人数多，室内空气中二氧化碳浓度不断升高，是本实验最大的误差来源。若先做样本测定，后做空白滴定，测定结果甚至出现负值。克服的办法可将广口瓶装满水，在室外迎风处将水倒净，换上室外空气(若用自来水，还应用无二氧化碳蒸馏水或煮沸过的冷开水洗涤广口瓶)，塞好橡皮塞，带回室内进行加液、滴定等操作。进行样本测定时也可在室外将装有萌发种子的小筐挂人瓶中，并开始记时。操作要注意到勿使口中呼出的气体进人瓶中。 六、实验报告 比较不同类型，不同温度下种子的呼吸强度。