第十章免疫分析技术..pptVIP

2.速率散射比浊法 速率是指抗原—抗体结合反应过程中，在单位时间内两者结合的速度。 速率散射比浊法是在抗原与抗体反应的最高峰(约在1分钟内)测定其复合物形成的量，该法具有快速、准确的特点。 3.激光散射浊度测定仪 (1) ARRAY特种蛋白分析测定系统 由微电脑控制，可以定量检测体液中微量蛋白的全自动组合仪器。 仪器主要部件 （1）散射测浊仪 光源采用双光源碘化硅晶 灯泡(400-620nm)； （2）加液系统 具有液体感知装置，控 制加液体积的准确性； （3）试剂和样品盘 （4）阅读器 读取卡片内贮存的参数。 仪器主要特点： IC悬浮颗粒所产生的散射光速率变化强弱与抗原浓度成正比； 速率峰值经微电脑处理转换成抗原浓度； 测到所需的速率峰值后，仪器通过峰值鉴定程序再对此峰值进行确证； 抗原过剩的监测 在抗原过剩的情况下，仪器重新对标本进行稀释，然后再次测定； 使用抗体、标准血清、抗体卡片和校正卡片。 DB 100特种蛋白分析测定系统，由分析仪、计算机打印机、条码读取器四部分组成。分析仪是该系统的主要部分，包括： （1）散射测浊仪 光源采用发光二极管 （2）加液系统 （3）支架运输装置 （4）比色杯装置 仪器主要特点： 固定时间测定： 利用两个时间光散射检测之间的差异，在免疫反应混合物预备10秒钟测定第一次光散射的值t1)，然后在反应6分钟后测定第二次光散射的值(t2) 终点检测法： 检测预温30分钟后光散射的值(t1)。通过终点光散射强度与贮存在计算机内校准曲线进行比较，即可得出该物质的浓度。 1．免疫功能监测； 2．心血管疾病检测； 3．炎症状况监测； 4．类风湿性关节炎的检测； 5．肾脏功能监测； 6．营养状态监测； 7．新生儿体检； 8．凝血及出血性疾病的检测； 9．贫血监测； 10．血脑屏障监测。 第五节 时间分辨荧光免疫分析仪 时间分辨荧光免疫测定基本原理是以镧系元素铕（Eu）螯合物作荧光标记物，利用这类荧光物质有长荧光寿命的特点，延长荧光测量时间，待短寿命的自然本底荧光完全衰退后再行测定，所得信号完全为长寿命镧系螯合物的荧光，从而有效地消除非特异性本底荧光的干扰。 测定原理  Ab*+Ag→Ab*Ag+Ab 抗原抗体反应后，先把Ab*Ag与Ab*分离， 然后测定Ab*Ag或Ab*中的标记物的量， 从而推算出标本中的Ag量， 该方法称为非均相荧光免疫测定法。 基本反应式如下： 用镧系三价稀土离子及其螯合物作为示踪物标记抗原、抗体、核酸探针等物质 当免疫反应发生后，根据稀土离子螯合物的荧光光谱的特点，用时间分辨荧光分析仪延缓测量时间，排除标本中非特异性荧光的干扰，所得信号完全是稀土元素螯合物发射的特异荧光，测定免疫反应最后产物的特异性荧光信号。 时间分辨荧光免疫分析的特点 特异性强 灵敏度高 标记物稳定 线性范围更宽，重复性更好 检测动态范围宽，可达4～5个数量级 标记物制备简单，稳定性好，使用时间长 时间分辨荧光免疫分析的应用 （一）蛋白质和多肽激素分析 （二）半抗原分析： （三）病原体抗原/抗体分析 （四）肿瘤标志物分析 （五）干血斑样品分析 （六）核酸分析 （七）测定天然杀伤细胞的活力 * * * 竞争法特点 分析灵敏度（最低检测限）（95%可信度）： S0-2SD在该曲线上所对应的浓度值。 功能灵敏度： （变异）≤20%的最低可检测浓度。 线性范围： 　　功能灵敏度-变异≤20%的最高检测浓度。 相关系数：≥0.99的曲线范围。 (一)全自动化学发光免疫分析系统 一般由主机和微机两部分组成： （1）主机部分：包括 原材料配备部分：反应杯、样品盘、试剂盘、纯净水、清洗液、废水在机器上的贮存和处理装置。 液路部分：过滤器、密封圈、真空泵、管道、样 品及试剂探针。 机械传动部分：传感器、运输轨道。 光路检测部分：光电倍增管和线路控制板。 2．仪器组成 全自动化学发光 免疫分析系统 66 IMMUNOLOGY (一)全自动化学发光免疫分析系统 2．仪器组成 （2）微机系统 程控操作 指示判定 数据处理 故障诊断 自动监视 （二)全自动微粒子化学发光免疫分析系统 采用微粒子化学发光技术对人体内的微量物质以及药物浓度进行定量测定具有高度的特异性、高度的敏感性和高度的稳定性等特点 全自动微粒子化学发光免疫分析系统 1.分析方法 采用磁性微粒作为固相载体，以碱性磷酸酶作为发光剂，扩大测定的范围。