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高二生们物选修3基因工程第一节
4、关于限制酶的说法中,正确的是( ) A、限制酶是一种酶,只识别GAATTC碱基序 列 B、EcoRI切割的是G—A之间的氢键 C.限制酶一般不切割自身的DNA分子,只切割外源DNA D.限制酶只存在于原核生物中 C 5. (多选)有关基因工程的叙述中,错误的是 A、基因工程技术能定向地改造生物的遗传 性状,培育生物新品种 B、重组DNA的形成在细胞内完成 C、目的基因须由运载体导入受体细胞 D、质粒都可作为运载体 BD 基因工程 通俗的说,就是按照人们的意愿,把一种生物的某种基因提取(复制)出来,加以修饰改造,然后放到另一种生物的细胞里,定向地改造生物的遗传特性。 一、基因工程的概念 优点: 与杂交育种相比 与诱变育种相比 1、周期短 2、可克服生殖隔离 3、目的性强,可定向改造生物性状 基因工程的别名 操作环境 操作对象 操作水平 基本过程 实质 结果 基因拼接技术或DNA重组技术 生物体外 基因 DNA分子水平 人类需要的基因产物 剪切 → 拼接 → 导入 → 表达 基因重组 基因工程的概念 基因工程培育抗虫棉的简要过程: 提取 棉花细胞(含抗虫基因) 苏云金芽孢杆菌 抗虫基因 与运载体DNA拼接 导入 普通棉花(无抗虫特性) 棉花植株(有抗虫特性) 上述基因工程培育抗虫棉的关键步骤: 关键步骤一: 抗虫基因从苏云金芽孢杆菌细胞内剪切提取出来 关键步骤二: 抗虫基因与运载体DNA连接 关键步骤三: 抗虫基因导入受体(棉花)细胞 二、 DNA重组技术的基本工具 准确切割DNA的工具(“分子手术刀”) ——限制性内切酶 DNA片段的连接工具(“分子缝合针”) ——DNA连接酶 基因转移工具(“分子运输车”) ——基因进入受体细胞的载体 基因的大小以纳米计算,要对它进行剪切、拼接等操作,没有非常精细的工具是不行的。进行基因操作最少需要以下三种工具: 思考 在自然界中有一些生物的DNA可能进入另一种生物的细胞中。我们有没有学过相关的实例? 现今存在的生物为什么没有在长期的进化过程中被外源DNA的入侵而灭绝,仍能保持一种稳定状态? 怎样才能使外来的DNA失效从而保护自身? 从哪里可以找到这种切割外来的DNA而对自身不切割的物质? 科学家是怎样找到这种酶的? 这种酶具有什么作用? 限制性核酸内切酶的作用: 能识别特定核苷酸序列; 从特定部位的两个核苷酸之间切开 。 作用结果:产生黏性末端或平末端 1.限制性核酸内切酶——“分子手术刀” 内切酶切割 DNA后形成的 末端——黏性 末端、平末端 是如何形成的? 回文序列 重播 DNA被限制酶切断后有两个反向互补的“黏性末端”。被同一种限制切断的几个DNA具有相同的黏性末端,能够通过互补进行配对。 2.基因的针线──DNA连接酶 切断的DNA片段要与受体细胞的DNA连接,你觉得可以用什么酶? 限制酶切割后有两种不同的结果,一种产生黏性末端,一种产生平末端。那么恢复它们的连接时,所用DNA连接酶是否可以不加选择? 可把黏性末端之间的缝隙“缝合”起来, E·coli DNA连接酶 或T4DNA连接酶 即恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键 3.基因进入受体细胞的载体 要让一个从甲生物细胞内取出来的基因在乙生物体内进行表达,首先得将这个基因送到乙生物的细胞内去!能将外源基因送入细胞的工具就是载体。 基因进入受体细胞的载体 假如目的基因导入受体细胞后不能复制将怎样? 作为载体没有切割位点将怎样? 目的基因是否进入受体细胞,你如何察觉? 如果载体对受体细胞有害将怎样?如果不能分离会怎样? 作为载体的必要条件 能自我复制 有切割位点 能与目的基因结合 能进入受体生物细胞并在受体生物细胞内复制并表达; 有遗传标记基因 对受体细胞无害、容易分离 比较容易得到 常见 运载体 能复制并带着插入的目的基因一起复制 有切割位点 有标记基因的存在,将来可用含青霉素的培养基鉴别。 练习 1.在基因工程中,切割运载体和含有目的基因的DNA片段,需使用( ) 同种限制酶 B. 两种限制酶 同种连接酶 D. 两种连接酶 2.基因工程常用的受体细胞有( ) (1)大肠杆菌 (2)枯草杆菌 (3)支原体 (4)动植物细胞 A. (3)(4) B. (1)(2)(4) C. (2)(3)(4) D. (1)(2)(3) 3.不属于质粒被选为基因运载体的理由是 A、能复制 ( )
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