姜黄素联合比卡鲁胺发抑制muc1-c信号通路对激素非依赖性前列腺癌的影响.docxVIP

广州中医药大学学位论文原创性声明本人郑重声明： 广州中医药大学学位论文原创性声明 本人郑重声明： 所呈交的学位论文，是个人在导师的指导下，独立进行研究工 作所取得的成果。除文中已经特别加以注明引用的内容外，本论文不含任何其他个人 或集体已经发表或撰写过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均 已在文中以明确方式标明并致谢。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。 学位论文作者签名监 日期：．20，乡年』月上0 El 关于学位论文使用授权的声明 本人完全了解广州中医药大学有关保留使用学位论文的规定，同意学校保留或向 国家有关部门机构送交论文的复印件和电子版，允许被查阅和借阅。本人授权广州中 医药大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影 印、缩印或其他复印手段保存和汇编本学位论文。 (保密论文，在解密后应遵守此规定) 论文作者签名缆论文导师签 日期：即f多年5月 IIIII IIIII I II I I Ili a II III Ul 摘 要 Y2825340 目的： 本研究对前列腺癌激素非依赖性细胞进行药物干预及信号通路相关的实验，观察 姜黄素对前列腺癌激素非依赖性细胞的作用，并探讨及联合给药的的作用机制。 方法： 1．采用MTT法检测细胞的抑制作用，对PC3、DUl45、LNCaP细胞进行姜黄素单药 药敏、姜黄素联合比卡鲁胺协同作用的试验观察其抑制效果。 2．用姜黄素不同浓度以及在不同的时间点处理细胞，用Western blot法观察MAPK 信号通路中SAPK／JNK、ERKl／2蛋白磷酸化的改变情况，同时检测目的蛋白MUCl一C、 P65蛋白的表达情况。用姜黄素最佳的处理浓度单独及联合比卡鲁胺处理PC3、DUl45 细胞，用Western blot法观察SAPK／JNK、ERKl／2激酶蛋白分子的磷酸化改变情况以 及目的蛋白MUCl一C、P65的表达情况。 结果： 1．MTT增殖抑制试验结果 (1)姜黄素单独使用对激素依赖性细胞和激素非依赖性细胞都具有抑制作用。 并呈现一定的时间依赖性和剂量依赖性。 (2)姜黄素联合比卡鲁胺对激素依赖性细胞和激素非依赖性细胞的作用，对于 单用比卡鲁胺而言，两者联用具有更强的抑制作用。 2．姜黄素干预PC3、DUl45细胞剂量依赖及时间依赖结果 (1)姜黄素对PC3、DUl45细胞进行干预的剂量依赖性实验中，MUCl-C、P65蛋 白成剂量依赖的下降趋势，说明姜黄素对PC3细胞这两蛋白具有调节作用，且不同剂 量之间的差异具有统计学意义(P0．05)。 (2)姜黄素对PC3、DUl45细胞时间依赖性实验中，p-SAPK／JNK及p-ERKl／2显 示较好的时间相关性，在不同的点之间与空白组分析，差异具有统计学意义(P0．05)。 3．姜黄素联合比卡鲁胺对激素非依赖性PC3、DUl45细胞干预目的蛋白和蛋白激 酶的变化 (1)姜黄素对PC3细胞的p-SAPK／JNK及p-ERKl／2的灰度值分别为1．41± 0．21，1．31±0．38，比卡鲁胺对PC3细胞的p-SAPK／JNK及p-ERKl／2的灰度值分别为 1．01±0．24，1．02±0．1，姜黄素联合比卡鲁胺对PC3细胞的p-SAPK／JNK及p-ERKl／2 的灰度值分别为1．76±0．27，1．65±0．17，联合给药组与单药组比较，差异具有统计 学意义(P0．05)。 (2)姜黄素对DUl45细胞的p-SAPK／JNK及p-ERKl／2的灰度值分别为1．29±0．11， 1．54±0．3，比卡鲁胺对DUl45细胞的P—SAPK／JNK及p-ERKl／2的灰度值分别为1．04 ±O．14，1．08±0．07，姜黄素联合比卡鲁胺对PC3细胞的p-SAPK／3NK及p-ERKI／2的 ±O．14，1．08±0．07，姜黄素联合比卡鲁胺对PC3细胞的p-SAPK／3NK及p-ERKI／2的 灰度值分别为1．54±0．23，1．98±0．3l，联合给药组与单药组比较，差异具有统计学 意义(P0．05)。 (3)姜黄素对PC3细胞的MUCI—C及P65的灰度值分别为0．5±O．03，O．49±0．07； 比卡鲁胺对PC3细胞的MUCI-C及P65的灰度值分别为0．74±0．0l，0．72±0．08；姜 黄素联合比卡鲁胺对PC3细胞的MUCI—C及P65的灰度值分别为0．33±0．04，0．29± 0．03；联合给药组与单药组比较，差异具有统计学意义(P0．05)。 (4)姜黄素对DUl45细胞的MUCI—C及P65的灰度值分别为0．48±0．07，0．46 ±0．09；比卡鲁胺对PC3细胞的MUCI-C及P65的灰度值分别为0．81±0．07，0．83± 0．04；姜黄素联合比卡鲁胺对P