第二章蛋白质化学1..ppt

第一节 概 述 一、蛋白质概念 是所有生物中普遍存在的，由天然氨基酸通过肽键连接而成的生物大分子，是非常重要的结构分子和功能分子，几乎所有的生命现象和生物功能都是蛋白质作用的结果，是生命活动的体现者。 肽键（peptide bond）：一个氨基酸的α-羧基与另一氨基酸的α-氨基脱水缩合而成的键 元素组成：主要:C、H、O、N、少量S;微量: P、Fe、Cu、Mn、Zn、Mg、Mo、I等。 化合物组成: 单纯蛋白质：其完全水解产物只有α-氨基酸。 结合蛋白质：由单纯蛋白与其它非蛋白成分结合（辅基）而成。 α-氨基酸： 20种基本氨基酸。 辅基 三、蛋白质的分类 单纯蛋白质（简单蛋白）：完全由氨基酸组成。 简单蛋白按溶解度又可分为7类： 四、蛋白质在自然界的分布及重要性 蛋白质是一切生物体的重要组成成分 从高等动植物到低等微生物 ； 从最复杂的人类到最简单的病毒 。 凡是有生命的地方，基本上都有蛋白质在起作用 蛋白质和核酸是生命的主要物质基础； 蛋白质是生物表现千差万别功能的基本物质。 阅读材料：蛋白质的生物学功能 第二节 氨基酸 一、蛋白质的水解 二、氨基酸的结构与分类 三、氨基酸理化性质 四、氨基酸的分离制备和分析鉴定 一、蛋白质水解 完全水解得到各种氨基酸的混合物； 部分水解通常得到肽片段及氨基酸的混合物。 氨基酸是蛋白质的基本结构单元。 大多数的蛋白质都是由20种氨基酸组成，这20种氨基酸被称为基本氨基酸。 酸水解 常用6 mol/L的盐酸或4 mol/L的硫酸在105-110℃条件下进行水解，反应时间约20小时。 优点:保持各种L-型氨基酸分子的立体结构不变； 缺点:色氨酸被破坏；天冬酰胺和谷氨酰胺侧链的酰胺基被水解成了羧基；含有羟基的氨基酸（丝氨酸、苏氨酸）有一小部分被分解。 目前用于蛋白质肽链断裂的蛋白水解酶（蛋白酶）已有十多种。 酶水解不会破坏氨基酸，也不会发生消旋作用。 酸或碱能够将多肽完全水解，酶水解一般是部分水解，水解的产物为较小的肽段。 水解位点特异，用于一级结构分析，或生产部分水解蛋白质制品。 或胰凝乳蛋白酶（Chymotrypsin）：R1= 苯丙氨酸Phe、色氨酸Trp、酪氨酸Tyr，水解速度快； 亮氨酸Leu、蛋氨酸Met、和组氨酸His,水解稍慢。 氨基酸是具有氨基（-NH3+）或亚氨基和羧基（-COOH）的有机分子。氨基酸种类多，但构成蛋白质具有遗传密码的氨基酸只有20种，这20种基本氨基酸称常见氨基酸。 二十种常见蛋白质氨基酸的分类、结构及三字符号 侧链只是烃链（5种） 侧链含有羧基或酰胺基（4种） 侧链含有碱性基团（3种）  杂环氨基酸 芳香族氨基酸 稀有氨基酸 非蛋白质氨基酸 存在于生物体内，但不组成蛋白质的呈游离或结合态的氨基酸，约150种，具有多种生理功能。 （1） L-α-氨基酸的衍生物 如 L-瓜氨酸和L-鸟氨酸是合成精氨酸的中间产物。 （2）D-α-氨基酸 如D-Ala存在于肽聚糖中，D-Phe是短杆菌肽S的组分。 （3）β、γ、δ-氨基酸 如β-Ala是泛酸的前体，γ-氨基丁酸是传递神经冲动的化学介质。 三、氨基酸的理化性质 （一）一般物理性质 组成蛋白质的氨基酸中色氨酸(Trp)、酪氨酸(Tyr)和苯丙氨酸(Phe)的R基团中含有苯环共轭双键系统，在近紫外光区（220 -300nm）显示特征的吸收谱带，最大光吸收（?max）分别为280、275、和259nm。 由于大多数蛋白质都含有这些氨基酸残基，可用紫外分光光度法测定蛋白质含量。 小结 氨基酸是两性化合物； 氨基酸的等电点（pI）: 3) 与2,4一二硝基氟苯(DNFB)的反应（sanger反应） 4) 与苯异硫氰酸酯（PITC）的反应（Edman反应） 2) 成盐反应： 氨基酸分子中的氨基和羧基可分别与酸和碱成盐。 3.α-氨基和α-羧基共同参加的反应 1)成肽反应：一个氨基酸的α-氨基和另一个氨基酸的α-羧基脱水缩合，生成酰胺化合物（肽）。 2)与茚三酮反应 4.个别R基团的反应 (1) 芳香环与浓硝酸反应 四、氨基酸的分离制备和分析鉴定 层析法也称色谱法，是1903年俄国植物学家茨维特首创。他将植物叶子的色素通过装填有吸附剂的柱子，各种色素以不同的速率流动后形成不同的色带而被分开，由此得名为“色谱法”（Chromatography) 。 后来无色物质也可利用吸附柱层析分离。 1941年出现纸层析。 以后层析法不断发展，相继出现气相层析、高压液相