《2第二章酶》-课件设计（公开）.pptVIP

（五）活性部位疏水空穴的影响 （一）酶促反应动力学： 是研究酶促反应速度以及影响速度的因素的科学。 影响酶促反应速度的因素与酶的特点密切相关 、这些因素有：温度、酸碱性、底物（substrate）浓度、酶浓度、激活剂（activators）和抑制剂（inhibitors）等。 五、酶促反应的动力学及其影响因素 一般来说，随着温度升高，化学反应的速度加快。在较低温度条件下，酶促反应也遵循这个规律。但是，温度超过一定数值时，酶会因热变性，导致催化活性下降。 最适温度（optimum T）：使酶促反应速度达到最大时的温度。 最适温度因不同的酶而异，动物体内的酶的最适温 度在37-40 0C左右。 5.1 温度对酶促反应速度的影响 酶反应的温度曲线和最适温度 5.2 溶液pH值对酶促反应速度的影响 最适pH（optimum pH）： 使酶促反应速度达到最大时溶液的pH。 酶的最适pH 与酶的性质、底物和缓冲体系有关 在其他条件确定时， 反应速度与酶的浓度 成正比。 5.3 酶浓度对酶促反应速度的影响 酶浓度对反应速度的影响 5.4 底物浓度对酶促反应速度的影响 在其他条件确定的情况下,在低底物浓度时, 反应速度与底物浓度成正比，表现为一级反应.当底物浓度较高时，v也随着[S]的增加而升高，但变得缓慢，表现为混合级反应。当底物浓度达到足够大时，反应速度也达到最大值（Vmax），此时再增加底物浓度，反应速度不再增加，表现为零级反应。 反应速度对于底物浓度的变化呈双曲线,称为米氏双曲线.其数学表达式为米氏方程。 0 零级反应 混合级反应 一级反应 Vmax v [S] 该曲线可以用米氏方程 来描述 （二）米氏方程式的推导（Michaelis-Menten） 酶底物生成ES的速度为:V 1= k1 [E] [S] ES分解的速度为: V2 = k2 [ES]+ k3 [ES] 当ES生成的速度(V 1)等于ES分解的速度(V2) k1 [E] [S] = k2 [ES]+ k3 [ES] [E] [S] [ES] = k2+ k3 k1 Km = k2+ k3 k1 [E] [S] [ES] = Km (1) [E] + [ES] [Et] = [Et] [ES] [E] = (2) 将(2)代入(1) ([Et] [ES]) [S] [ES] = Km [ES] = [Et] [S] Km+ [S] (3) 因为酶促反应速度与[ES]成正比的,所以 V = k3 [ES] [ES] = V k3 (4) 将（4）代入（3）得： V k3 [Et] [S] Km+ [S] = = V [Et] [S] Km+ [S] k3 (5) 当反应体系中的底物浓度极大，而使所有的酶分子都以ES形式存在（既[Et] = [ES] ）时。反应速度达到最大值（既最大反应速度，Vmax）。因此， V max = k3 [Et] (6) 将（6）代入（5），得： = V [S] Km+ [S] V max (7) 由米氏方程可知，米氏常数是反应最大速度一半时所对应的底物浓度,即当v = 1/2Vm时，Km = S ? Ｋm越大，说明Ｅ和Ｓ之间的亲和力越小，ＥＳ复合物越不稳定。 当Ｋm越小时，说明Ｅ和Ｓ的亲和力越大，ＥＳ复合物越稳定，也越有利于反应。 米氏常数Ｋm对于酶是特征性的。每一种酶对于它的一种底物只有一个米氏常数。 米氏常数及其意义 米氏常数的求法 双倒数作图法(double-reciproealplot法，Lineweaver-Burk法)：实验时选择不同的[S]测定对应的V。求出两者的倒数，以1/V对1/[S]作图，绘出直线外推至与横轴相交，横轴截距(-X)即为1/Km值，Km＝-1/x。 Km的作图法求解 抑制剂对酶反应的影响 　 酶是蛋白质，凡可使蛋白变性而引起酶活力丧失的作用称为失活作用。凡使酶活力下降，但未引起酶蛋白变性的作用称为抑制作用(inhibition)，能引起这种抑制作用的物质称为酶的抑制剂(inbitior)。凡是能提高酶活性的物质，都称为激活剂（activator）  抑制作用 可逆抑制作用 不可逆抑制作用 ①.不可逆的抑制作用(irreversible inhibition)　　这类抑制剂通常以比较牢固的共价键与酶蛋白中的基团结合，而使酶失活，不能用透析、超滤等物理方法除去抑制剂恢复酶活性。这类抑制剂均为剧毒物质如：重金属、有机磷、有机汞、有机砷、氰化物、青霉素、毒鼠强等等。 ②.可逆的抑制作用(reversible i