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第三节 氨基酸的测定 氨基酸分析 成人必需氨基酸共有８种：赖氨酸、色氨酸、苯丙氨酸、蛋氨酸、苏氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、缬氨酸。 如果饮食中经常缺少上述氨基酸，可影响健康。对婴儿来说，组氨酸也是必需氨基酸 。 原理 氨基酸分析仪的中心是离子交换层析柱，当流动相（缓冲溶液）推动氨基酸流经装有阳离子交换树脂的色谱柱时（日立835-50为磺酸型Na+柱），氨基酸与树脂中的交换基团进行离子交换，当用不同的PH值的缓冲溶液进行洗脱时，因交换能力不同而将氨基酸混合物分开。 洗脱的顺序为：酸性氨基酸和极性较大的氨基酸,其次是非极性的和芳香性氨基酸，最后是碱性氨基酸（赖氨酸、精氨酸、组氨酸）。相对分子质量小的比相对分子质量大的先下来，被洗脱的氨基酸用茚三酮显色，进行定量比色分析。 利用经硫化的阳离子交换柱,可分离二十多种氨基酸,将分离得到的氨基酸与水合茚三酮反应生成兰紫色化合物, ,在可见光范围(570nm和440nm)测定吸光度,从而完成检测和定量测定。 与氨基酸的标准溶液相比较,从而确定各种氨基酸的含量，根据与标样物比较相对保留时间和加入标样使峰增高法进行定性,采用内标和标准曲线法进行定量。 内标法: 内标法是将一定量的纯物质作为内标物,加入到准确称量的试样中,根据被测物和内标物的质量及在色谱图的峰面积或峰高的变化,就可以看出标准品和样品进样体积的差别。 内标物要满足以下要求：