侯选抑癌基因fhit在原发性肝癌和胃癌中缺失与突变的研究-生物化学与分子生物学专业论文.docxVIP

安徽医科大学硕士学位论文英文缩略词表 安徽医科大学硕士学位论文 英文缩略词表 缩略词 英文全称 中文名称 FHIT Fragile llisfidme triad gene 脆性组氨酸三联体基因 PCR polymerase chain reaction 聚合酶链式反应 PCR—SSCP polymeraSe chaill reaction single 聚合酶链式反应． ．strand confirmation polymorphism 单链构象多态性 RT-PCR reserse lxanscription PCR 反转录聚合酶链式反应 LOH Toss ofheterozygosity 杂合性缺失 HCC hepatocellular carcinoma 肝细胞癌 ORF open reading frame 开放阅读框架 AP3A dinucleoside 5’，5’．Pl,p3．triphosphate三磷酸二腺苷酸 MI microsatellite instability 微卫星序列不稳定 安徽医科大学硕士学位论文侯选的抑癌基因FHIT在原发性肝癌和胃癌中缺失与突 安徽医科大学硕士学位论文 侯选的抑癌基因FHIT在原发性肝癌和胃癌中缺失与突 一～～ 变的研究 摘 要 目的对20例原发性肝细胞癌(HCC)和26例胃实体瘤的手术切除标本的抑癌基因 FHIT外显子5、外显子8的纯合性缺失和点突变进行检测。构建FltIT第八外显子 的克隆。方法收集癌手术标本，提取癌细胞DNA，建立PCR方法研究外显子5，8 的纯合性缺失；使用PCR—SSCP方法研究FflIT外显子5和外显予8的点突变；采用 PCR产物克隆的方法构建FHIT第八外显子的充隆J结果发现在26例原发性胃癌 中FHIT外显子5的纯台性缺失率为11．5％(3／26)?外显子8的缺失率为15．4％ (4／26)：其中，缺失外显子5的3例标本同时也缺失外显子8；FHIT异常率为15．4％ (4／26)。在20例肝细胞癌中外显子5的纯合性缺失率为10％(2／20)，外显子8 的纯合性缺失率为30％(6／20)；其中。有一例标本既缺失外显子5也缺失外显子 8；FHIT的异常率为3596(7／20)。在被检的肿瘤组织细胞中未发现FltIT外显子5 和外显子8存在点突变。被检的正常人白细胞中未发现FItlT缺失和点突变的情况。 pBK-FHIT重组质粒的核酸内切酶谱分析表明其酶切位点与原设计相符，插入DNA 片段大小为193bp，与弓 小一致：PCR扩增重组质粒，可扩增出与设计相 符的193bp的DNA片 研究表明，FItIT的缺失只发生在肿瘤细胞中。 在肝癌中。外显子5和外显子8(尤其是外显子8)的纯合性缺失是FHIT基因失活的 重要方式之一。相反，胃癌中外显子5和外显子8的的纯合性缺失可能不是FHIT 基因失活的主要方式。但并不排除其他的失活方式。点突变可能不是肿瘤中FflIT 失活的主要方式。我们成功构建了FHIT第八外显子的克隆，为进一步研究州IT 基因奠定了基础。～。：=吣呼’n弋纯弋缺 、 变：基因克隆 飞 l ＼ 安徽医科大学硕士学位论文Studies 安徽医科大学硕士学位论文 Studies on deletion and mutation ofFHIT gene-a candidate tumor suppressor gene in gastric careinoma and hepatocellular carcinama Abstract Objective To investigate the homozygous deletion and point mutation of exon5 and exon8 of FHIT_一a candidate tumor suppressor gene gastric carcinoma and hepatocellular carcinoma(HCC)．And To construct the DNA fragment clone of FHIT exon8 Methods We collected 26 surgical samples of gastric carcinoma and 20 surgical samples ofHCC，and all these samples were diagnosed by pathology．DNA was extracted from these tissues．The method of polymerase chain reaetion(PCR)was set up to analyze the homozygous deletion