茶树脱落酸β-葡萄糖基转移酶基因CsAOG克隆和表达分析.PDF

安徽农业大学学报, 2018, 45(5): 783-789 Journal of Anhui Agricultural University [DOI] 10.13610/ki.1672-352x015 网络出版时间：2018/10/25 10:55:24 [URL] /kcms/detail/34.1162.S1634.030.html 茶树脱落酸 β-葡萄糖基转移酶基因 CsAOG 的克隆和表达分析 * 王雷刚，孙琪璐，吴峻琪，蒋家月，李叶云，江昌俊 (安徽农业大学茶与食品科技学院，茶树生物学与资源利用国家重点实验室，合肥 230036) 摘 要：脱落酸（ABA ）β- 葡萄糖基转移酶（abscisate beta-glucosyltransferase）是ABA 分解代谢途径中的关 键酶，在维持植物体内ABA 正常生理水平上发挥着重要作用。通过RACE 法克隆了茶树中ABA β- 葡萄糖基转移 酶基因CsAOG，NCBI 登录号为MF370238 。CsAOG 全长为2 108 bp ，ORF 大小为1 443 bp，无内含子，该基因编 码480 个氨基酸，分子量约为53.26 kDa，等电点为5.58，亚细胞定位于细胞质。CsAOG 蛋白具有葡萄糖基转移酶 （UDPGT ）保守结构域。通过MEME 分析工具在CsAOG 序列中获得了9 个保守元件。由系统进化和蛋白互作分 析可知，CsAOG 位于UGT73 分支，且UGT73B4 与UGT73B5 的互作最强。实时荧光定量结果表明，叶中CsAOG 表达水平最高，根部次之，茎中最低；在越冬期间，乌牛早CsAOG 表达量先上调后下调，最后维持在较低水平； 舒茶早和黄山早芽CsAOG 表达量呈下调趋势。赤霉素处理后，乌牛早CsAOG 表达量上调；高温胁迫后CsAOG 表 达量呈先升后降的趋势，12 h 时表达量最高，而低温胁迫时表达量变化不大。通过对CsAOG 基因的研究，为理解 ABA 在调控茶树生长发育和抗逆机制中的作用提供了理论基础。 关键词：茶树；脱落酸β- 葡萄糖基转移酶；基因克隆；表达分析；多种胁迫 中图分类号：S571.1 文献标识码：A 文章编号：1672352X (2018)05078307 Cloning and expression analysis of the CsAOG encoding abscisic acid β-glucosyltransferase in Camellia sinensis WANG Leigang, SUN Qilu, WU Junqi, JIANG Jiayue, LI Yeyun, JIANG Changjun (State Key Laboratory of Tea Plant Biology and Utilization, School of Tea Food Science and Technology, Anhui Agricultural University, Hefei 230036) Abstract: Abscisic acid (ABA) β-glucosyltransferase is a key enzyme in ABA catabolic pathway, which plays an important role in regulating the ABA normal physiological level in plants. In this study, the full length of CsAOG gene encoding ABA β-glucosyltransferase from tea plants was cloned by RACE method (NCBI accession