任务1-4-1(2)谷氨酸发酵工艺.pptVIP

2 pH的控制 一般发酵前期pH控制在7.5-8.5左右，发酵中、后期pH控制在7.0～7.2，调低pH的目的在于提高与谷氨酸合成有关的酶的活力。 谷氨酸发酵在中性和微碱性条件下可积累谷氨酸，而在酸性条件下则容易形成谷酰胺和N-乙酰谷酰胺。 尿素被谷氨酸生产菌细胞的脲酶所分解放出氨，因而发酵液的pH会上升。 发酵过程中，由于菌体不断利用氨，以及有机酸和谷氨酸等代谢产物进入发酵液，使N源不足和发酵液pH下降，需再次流加尿素 。 3 溶解氧的控制 谷氨酸产生菌是兼性好氧菌 在实际生产中，搅拌转速固定不变，通常用调节通风量来改变供氧水平。 原则：发酵前期，以低通风量为宜； 发酵中、后期，以高通风量为好。 通风比（ m3 /m3 .min ）：每分钟向1m3的发酵液中通入0.1cm3无菌空气，用1:0.1表示。 4.流加糖控制 流加时间 流加速度 流加量 5 种龄和种量的控制 微生物的生长大致可分为适应期、对数期、稳定期、衰老期 种龄：一级种子菌龄控制在11～12h，二级种子菌龄为7～8h。 种量：指接入发酵罐内种子的量占发酵罐内发酵培养基量的百分比。接种量的多少对适应期的延续时间也有很大的影响。接种量一般以1％为好。 种量过多，使菌体生长速度过快，菌体娇嫩，不强壮，提前衰老自溶，后期产酸不高；如果接种量过少，则菌体增长缓慢，会导致发酵时间延长，容易染菌。 6 OD值的控制 OD值是细菌个数、菌体大小和发酵液色泽深浅的综合反应。 以B9和T6-13菌株为例，当初糖为12.5％～14%时，长菌期的OD净增值在0.7～0.9。 当细胞进入平衡期后，OD值已达到最大值，此时细胞数不再增加，但因为细胞个体还会继续伸长增大，所以OD值会略有上升。 6 OD值的控制 生物素是谷氨酸生产菌不可缺少的生长因子。当培养基的生物素将被耗尽时，细菌就停止增殖。 提高生物素的含量，OD值会上升，但一方面细胞的膜通透性会变差，影响谷氨酸从胞内往胞外渗出；另一方面，在高生物素环境下，菌体只进行增殖并不生成谷氨酸。 因此，控制OD值的增长，是保证菌体在胞外大量蓄积谷氨酸的重要手段。 7 泡沫的控制 生产上为了控制泡沫，除了在发酵罐内安装机械消泡器外，还在发酵时加入消泡剂。 目前谷氨酸发酵常用的消泡剂有： 花生油、豆油、玉米油、棉子油、泡敌和硅酮等。 天然油脂类的消泡剂的用量较大，一般为发酵液的0.1%～0.2%(体积分数)， 泡敌的用量为0.02%～0.03%(体积分数)。 发酵罐 四、发酵异常现象及处理 1.污染杂菌和感染噬菌体引起的发酵异常 （1）污染杂菌 污染杂菌后，OD值增长快，糖耗也快，且发酵液泡沫增多，但谷氨酸生成量少。 处理： 如果发酵前期发现杂菌污染，可将培养基重新灭菌，并酌加培养基成分，重新接种后再发酵。 如果发酵中期发现染菌，而pH、OD值和糖耗等尚属正常，此时可加大风量，按常规继续发酵。 如果发酵后期染菌，一般对发酵影响不大。 （2）感染噬菌体 感染噬菌体后，OD值不上升甚至下跌，因此发酵液pH上升且变得粘稠，泡沫也增多。发酵液中很少有谷氨酸蓄积。 处理： 如果发酵前期发现感染噬菌体，可将培养基重新灭菌，或采用并罐法。 如果发酵中期发现感染噬菌体，将培养基在70℃加热10min杀死噬菌体，补料补种，重新发酵。 如果发酵后期染菌，一般对发酵影响不大。 2.种子质量差引起的发酵异常 将种龄过长或活力弱的种子接入发酵罐后，在发酵中、后期，糖耗就变得缓慢，pH不下降、波动不活跃，谷氨酸生成量少。 处理： 停止搅拌或减小通风量，追加生物素、磷盐和镁盐。 3.培养基配比差错引起的发酵异常 （1）生物素 生物素是谷氨酸生产菌不可缺少的生长因子。 生物素不足，长菌慢，糖耗慢，菌体生长不足。 生物素过量，葡萄糖的消耗被用于菌体增殖。 生物素 （2）磷盐。磷在微生物细胞中含量较高，它是合成核酸、核蛋白、磷脂、各种核苷酸和辅酶的重要元素。 如果培养基中不加或少加磷酸盐，则菌体生长缓慢，糖耗慢，最终菌体生长不足。 如磷盐过多，糖的降解都通过EMP和TCA，菌体增殖快。 4.发酵条件控制不当引起的发酵异常 通风量 发酵前期通风量不足，影响不大；中后期供氧不足，则谷氨酸生成少。 温度 发酵前期、中期温度过高，细胞易衰老；温度过低，发酵周期长。 pH 发酵终点判断 发酵终点：残糖在1%以下且糖耗缓慢（0.15%）或残糖0.5%。 达到放罐标准后，及时放罐 * 任务1-4-1谷氨酸发酵工艺 1、工艺流程 2、发酵工艺参数控制 3、发酵异常现象及处理 一、谷氨酸的生产工艺流程 谷氨酸菌种的扩大培养 普遍采用二级种子培养流程: 即保