第13章可蛋白质生物合成.ppt

第十三章 蛋白质的生物合成 Biosynthesis of Protein 教学目的与要求： 1、掌握遗传密码的原理和特点、tRNA运载氨基酸的机理、蛋白质生物合成过程。 2、熟悉原核细胞与真核细胞在蛋白质合成上的区别、蛋白质翻译后加工修饰。 3、了解细胞中蛋白质的穿膜、真核生物蛋白质的分泌。 教学重点和难点：蛋白质合成的过程 教学安排：6课时 一、遗传密码 遗传密码 ( genetic code ) ： 指mRNA中的核苷酸序列与多肽中氨基酸序列之间的对应关系。 通常是指核苷酸三联体决定氨基酸的对应关系, 故也称三联体密码或密码子。 1、三联体密码的破译 1954年物理学家Gamov G 首先对遗传密码进行探讨: 41=4; 42=16; 43=64, 足以编码20种氨基酸, 密码子 (codon) 应是三联体（triplet）。 Gamov确认核酸分子中三个碱基决定一个氨基酸。 1961年Crick 等用遗传学方法也证实三联体密码子学说是正确的。 Nirenberg以均聚物共聚物为模板指导多肽的合成，寻找到了破译遗传密码的途径。 Khorana以共聚物指导多肽的合成，加快了破译遗传密码的步伐。 核糖体结合技术完全破译了遗传密码。 2、密码子的确定 密码子或称三联体密码： 即mRNA上决定一个特定氨基酸的三个核苷酸 。 用各种人工合成模板在体外翻译蛋白质的方法确定 用核糖体结合技术测定密码子中的核苷酸排列顺序 1961 ~ 1965年 4 年时间，完全确定了编码20种天然氨基酸的密码子，编出了遗传密码字典。 1961年，Nirenberg建立体外无细胞蛋白质合成体系。证明了mRNA的模板作用。 　 　 3、遗传密码的破译 poly(U) →UUU→ 多聚苯丙氨酸（UUU是Phe的密码子） poly(C) →CCC → 多聚脯氨酸（CCC是Pro的密码子） poly(A) →AAA→多聚赖氨酸（AAA是Lys的密码子） 以特定的共聚物为模板指导多肽的合成 在外无细胞蛋白质合成体系中，以两种核苷酸或三种核苷酸的共聚物作模板，重复试验。 （1）以多聚二核苷酸作模板可合成由2个氨基酸组成的多肽 ,如以Poly (UG )n为模板，合成产物为Poly Lys-Val。 （2）以多聚三核苷酸作为模板，可得3种氨基酸组成的多肽，如以Poly (UUC )n为模板，合成产物为Poly Phe 、PolySer、PolyLeu 。 ……UUCUUCUUCUUCUUCUUC…… UUC-UUC-UUC-UUC-UUC-UUC→Poly Phe U-UCU-UCU-UCU-UCU-UCU-UC →Poly Ser UU-CUU-CUU-CUU-CUU-CUU-C →Poly Leu （二）遗传密码的基本特征 1. 遗传密码的连续性(commaless) 密码子之间没有任何起“标点”作用的空格,阅读mRNA 时是连续的,一次阅读3个核苷酸(碱基) 2. 遗传密码的不重叠性(nonoverlapping) 在绝大多数生物中,阅读mRNA时是以密码子为单位，不重叠地阅读。 少数大肠杆菌噬菌体的RNA基因组中部分基因的遗传密码是重叠的。 3.遗传密码具有简并性（degeneracy） (1)除Met(AUG)和Trp(UGG)外,每个氨基酸都有两个或更多的密码子,这种现象称为密码子的简并性（degenecy）。 (2)同义密码：同一个氨基酸的不同密码子称同义密码子（synonyms）。 (3)简并性的生物学意义: 减少有害突变, 对生物物种的稳定有一定意义 (4)密码的简并性往往表现在密码子的第三位碱基上。 4. 密码的变偶性——摆动性(wobble) tRNA上的反密码子与mRNA上的密码子配对时, 密码子的第一位、第二位碱基配对是严格的,第三位碱基可以有一定变动, Crick称这种现象为密码的摆动性或变偶性( wobble )。 （在密码子3′端的碱基和反密码子5′端的互补碱基之间形成的相对松散的碱基配对－－摇摆现象。） 显然, 密码子的专一性基本取决于前两位碱基，第三位碱基起的作用有限(有较大灵活性)。所以几乎所有氨基酸的密码子都可以用XYA(G)和 XYU(C )来表示。 6.密码子有起始密码子和终止密码子 (1) 起始密码子: AUG(Met) 多数原核，真核生物GUG 少数情况 (2) 终止密码子: UAA、UAG、UGA 不编码任何氨基酸, 又称为无义密码子 (nonsense codons)或终止密码子(chain-termi