电场响应纳米水凝胶的制备及抗癫痫作用研究-药理学专业论文.pdf.docxVIP

本研究受以下课题资助1．国家自然科学基金重点项目 本研究受以下课题资助 1．国家自然科学基金重点项目 课题名称：癫痫异常网络导致认知行为障碍的分子基础 2．国家自然科学基金项目 课题名称：结合电生理学与主动靶向技术的抗癫痫电场敏感纳米水凝胶的研究 3．国家自然科学基金创新群体 课题名称：突触和神经环路调控的分子机制及其在神经精神疾病中的作用 万方数据 浙江大学博士学位论文 浙江大学博士学位论文 致谢 致谢 四年半的博士生活一晃而过，一路走来，收获了很多。首先，诚挚的感谢我 的导师陈忠教授，感谢陈老师给了我再次深造的机会。课题研究中从论文的选题、 设计到写作、定稿，自始自终都离不开陈老师的指导。陈老师渊博的知识、严谨 的学风、坦荡的胸怀和对科研的执着态度，将使我终身受益，是我今后工作和生 活中永远的楷模。 感谢导师组成员高建青教授，感谢高老师对本论文研究的精心指导，感谢高 老师对我学习、工作和生活中无微不至的关怀。高老师积极乐观并富有激情的工 作态度和敬业精神深深地感染着我，是我学习和努力的方向。 感谢药物制剂研究所杜永忠教授对我课题研究的耐心指导以及工作和生活上 给予的关怀和帮助。感谢实验室汪仪博士对药效学实验部分的直接帮助和辛勤付 出，感谢实验室袁扬对细胞实验的帮助和指导。感谢实验室张世红、胡薇薇、张 翔南、侯伟伟老师及实验室其他小伙伴们对我课题研究给予的帮助。 感谢我的硕士导师浙江大学药物制剂研究所胡富强教授一直以来对我的支持。 感谢浙江大学药物制剂研究所梁文权教授、袁弘教授和韩曼副教授对我课题研究 和工作中的关心和帮助。感谢浙江大学农生环测试中心王华老师在透射电子显微 镜测试中给予的指导和帮助，感谢浙江大学医学院仪器平台老师对流式细胞测定 的帮助。感谢所有对课题有过帮助的老师和同学，是你们的支持让我的科研得以 顺利进行。 感谢我的父母、我的先生和我的儿子，你们一直以来默默的关心和支持，是 我前进的动力。 最后，由衷感谢在百忙之中抽出时间对我的论文进行审阅并提出宝贵意见的 各位专家。 万方数据 浙江大学博士学位论文 浙江大学博士学位论文 中文摘要 电场响应纳米水凝胶的制备及抗癫痫作用研究 浙江大学药学院 药理学 博士研究生 应晓英 导师 陈忠教授 摘要 癫痫作为神经系统常见的疾病之一，其药物治疗存在靶向性差，易引起毒副 作用和耐药等问题。癫痫的发作是脑内神经元阵发性异常超同步化电活动的结果， 将癫痫灶点异常放电限制在局部并及时抑制，是阻止癫痫发作的关键。本文结合 癫痫发作的电生理学机制和主动靶向技术，构建脑靶向电场响应纳米水凝胶。通 过脑靶向肽介导纳米载体靶向累积于脑部，并在癫痫发作之际，在消弱癫痫样放 电的同时快速释放药物，实现癫痫的高效治疗。本文的主要研究内容如下： 1、电场响应纳米水凝胶的合成与评价。以甲基丙烯酸二甲胺基乙酯、苯乙烯 和对苯乙烯磺酸钠(Sodium 4-vinylbenzene sulfonate，NaSS)为单体，以N，N’-2 甲基双丙烯酰胺为交联剂，过硫酸钾．焦亚硫酸钠为氧化还原体系引发剂，通过无 皂乳液共聚法合成具有电场响应功能的纳米水凝胶。所合成的纳米水凝胶荷正电、 粒径在50～146 nln之间；纳米水凝胶在水性介质中可快速(1min)响应电场变化， 纳米粒溶胀，粒径变大，其变化程度与NaSS的含量有关；以苯妥英钠(PHT)为 模型药物，干凝胶溶胀于药物水溶液的方法制备负载PHT纳米水凝胶；载药纳米 水凝胶的体外释放速率与其粒径有关，粒径大于100 nlTl的载药纳米水凝药物释放 速率相对较慢；同时药物从纳米水凝胶中的释放具有电场响应特性，100衅电场 作用1 rain后，其在0．5 h时的药物释放量最大可增加0．71倍，其增加倍数与纳米 II 万方数据 浙江大学博士学位论文 浙江大学博士学位论文 中文摘要 水凝胶中的NaSS含量有关。通过调整纳米水凝胶的组成筛选得到理想的电场响应 纳米水凝胶用于后续研究。 2、脑靶向电场响应纳米水凝胶的合成与评价。为了实现纳米水凝胶的脑部传 递，利用脑靶向多肽Angiopep．2对纳米水凝胶进行修饰。在纳米水凝胶处方中添 加两端具有反应活性的琥珀酰亚胺聚乙二醇丙烯酸酯，合成聚乙二醇修饰的纳米 水凝胶，再利用纳米水凝胶表面聚乙二醇链段末端的琥珀酰亚胺与多肽 Angiopep．2中氨基的化学反应，制备Angiopep-2修饰纳米水凝胶(ANG—ERHNPs)。 ANG．ERHNPs保持了电场快速响应功能；ANG．ERHNPs在bEnd．3细胞上表现为 低毒性，IC50为449．0 gg／mL；ANG．ERHNPs有较好的跨体外BBB模型转运的能 力，4 h的累积透过百分