基于Mn掺杂ZnS量子点磷光内滤效应检测茁鄄葡萄糖醛酸酶-分析化学.PDF

第45卷 分析化学 (FENXI HUAXUE)摇 研究报告 第12期 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 摇 2017年12月 ChineseJournal of Analytical Chemistry 1909~1914 DOI:10.11895/j.issn.0253鄄3820.171216 基于Mn掺杂ZnS量子点磷光内滤效应检测茁鄄葡萄糖醛酸酶 1 1 *1,2 *2 唐丹丹摇 张金懿摇 侯贤灯 摇 吴 鹏 1 2 (四川大学化学学院 ,分析测试中心 ,成都610064) 摘摇 要摇 高效荧光内滤分析的关键是使猝灭剂的吸收峰与荧光团的激发峰或发射峰最大限度地重叠。 本研 究将Mn掺杂ZnS量子点(Mn鄄ZnS QDs)作为内滤体系的荧光体,4鄄硝基苯鄄茁鄄D鄄葡糖苷酸(PNPG)作为吸收 体,实现了茁鄄葡萄糖醛酸酶(GUS)的特异性检测。 PNPG的吸收光谱与Mn鄄ZnS QDs的激发光谱大幅重叠,能 够高效猝灭Mn鄄ZnS QDs的磷光。 由于Mn鄄ZnS QDs具有较大的斯托克斯位移(约300 nm),其激发光谱和发 射光谱与GUS的酶解产物PNP 的吸收光谱几乎无重叠,因而实现了GUS的磷光Turn鄄on检测。 此外,Mn鄄ZnS QDs具有优异的室温磷光性质,可以避开生物组织荧光背景,从而可有效应用于生物样品分析。 据此建立了 一种基于内滤效应的GUS磷光探针,实现了对大肠杆菌的测定。 本方法在最优的实验条件下对10~300 U/ L 的GUS有线性响应,检出限为7 U/ L,且本策略相对于紫外鄄可见光谱法有很好的抗基底干扰能力。 关键词摇 茁鄄葡萄糖醛酸酶;Mn鄄ZnS量子点;内滤效应;大肠杆菌 1摇 引言 茁鄄葡萄糖醛酸酶(GUS)广泛存在于动植物与微生物中,它能够催化茁鄄D鄄吡喃葡萄糖基底物水解为 [1] [2,3] 相关的糖苷配基和D鄄葡萄糖醛酸 。 人体内茁鄄葡萄糖醛酸酶水平的升高与一些癌症有关 ,如结肠 [4,5] [4] 癌 、肾癌 等。 此外,由于茁鄄葡萄糖醛酸酶是一种大肠杆菌的特异性酶,所以针对茁鄄葡萄糖醛酸酶 [6,7] 的分析所建立的大肠杆菌检测方法也有许多报道 。 目前,针对茁鄄葡萄糖醛酸酶的检测的方法大多 [5,7] [8] 集中在比色法 和基于有机荧光探针的化学传感法 。 然而,比色法常受到基质干扰,导致茁鄄葡萄糖 醛酸酶的检测受到影响;有机探针传感法所用底物的合成通常复杂且耗时。 因此,发展简单有效的检 测茁鄄葡萄糖醛酸酶的方法非常重要。 内滤效应(IFE)作用机制是由于猝灭剂的吸收光谱与荧光团的激发光谱或发射光谱有重叠作用而 [9] [10] 引起的荧光猝灭。 相比于传统的光物理过程,如共振能量转移 、电子转移 等,内滤效应过程无需考 虑荧光物质与吸收物之间的距离,避免许多繁琐的标记,因此,内滤效应作为一种简单有效的荧光猝灭 机制被广泛用于荧光传感分析[11,12]。 内滤效应作用的关键是使猝灭剂的吸收光谱与荧光团的激发光 谱或发射光谱最大限度的重叠,从而引起荧光团最大限度的猝灭。 由于传统的有机荧光染料的激发或 发射光谱确定,很难有吸收物的吸收光谱与它们完全匹配,而量子