EGF类生长因子来源的新型靶向肽在抗肿瘤药物蛋白中的应用.PDF

中国生物工程杂志　ＣｈｉｎａＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，２０１７，３７（３）：１９ ＤＯＩ：１０．１３５２３／ｊ．ｃｂ 檪檪檪檪檪檪檪檪殏 檪 殏 檪 研究报告檪 殏 檪 殏檪檪檪檪檪檪檪檪 ＥＧＦ类生长因子来源的新型靶向肽 在抗肿瘤药物蛋白中的应用 １ １ ２ １ ２，３ 陈　坤 　曹雪玮 　张　琴 　赵　健 　王富军 （１华东理工大学生物反应器工程重点实验室　上海　２００２３７　２浙江日升昌药业有限公司　东阳　３２２１００） （３上海中医药大学中药研究所　上海　２０１２０３） 摘要　许多肿瘤细胞表面表皮生长因子受体ＥＧＦＲ都存在过表达现象。考察了牛痘病毒生长因 子（ＶＧＦ）中的ＥＧＦＲ结合域（Ｓ３）与人的肝素样表皮生长因子（ＨＢＥＧＦ）来源的肝素结合域（命名 为ＨＥ）重组后对肿瘤细胞的选择性。通过重组表达带有靶向和穿膜结构域的ＥＧＦＰＳ３ＨＥ和 ＥＧＦＰＳ３ＨＥＴＡＴｍ两种融合蛋白与正常细胞和肿瘤细胞的共孵育实验来研究其对肿瘤细胞的特 异性靶向吸附和穿膜效应。进一步将Ｓ３ＨＥＴＡＴｍ靶向穿膜序列与苦瓜来源的核糖体失活蛋白 ＭＡＰ３０融合，可显著提高ＭＡＰ３０对肿瘤细胞的抑杀作用，但这种抑杀作用却对正常细胞仍保持 在较低水平。由此表明Ｓ３ＨＥＴＡＴｍ是一种新型优异的肿瘤细胞靶向药物运输载体，可用于肿瘤 治疗的进一步开发研究。 关键词　肿瘤靶向肽　牛痘病毒生长因子　表皮生长因子　细胞穿膜肽　抗肿瘤药物 中图分类号　Ｑ７１ 　　ＭＡＰ３０是一种来源于苦瓜的 型核糖体失活蛋 药物分子富集到肿瘤细胞而大大降低药物分子对正常 Ⅰ 白，文献报道其具有抗肿瘤药理活性，但 ＭＡＰ３０本身 细胞可能存在的毒副作用，因而成为目前靶向药物运 ［６］ 的低细胞穿膜特性限制了其在肿瘤治疗中的应用开发 输载体的研究热点 。在这方面研究中，人们除了对 ［１］ 研究 。细胞穿膜肽（ｃｅｌｌｐｅｎｅｔｒａｔｉｎｇｐｅｐｔｉｄｅｓ，ＣＰＰ）是 肿瘤细胞表面特异性表达的蛋白多糖（如 ＨＳＰＧ）有较 一类能携带药物分子（大分子， 多关注以外，更多都关注到在多种肿瘤细胞表面都存 ＤＮＡ和ＲＮＡ）进入细胞 ［２３］ 在表皮生长因子受体家族（ＥＧＦＲｆａｍｉｌｙ）过表达的现 的短肽 ，其中ＴＡＴ是一种来源于ＨＩＶ１转录因子的 经典穿膜肽，可携带多种蛋白质分子（包括抗肿瘤蛋白 象，而且这种过表达与肿瘤的发生、发展、转移有密切 ［４］ 联系。因此，它们成为了肿瘤疾病靶向治疗的热门靶 药物）跨越细胞膜屏障进入细胞 。不过，现有的ＣＰＰ ［７８］ 普遍都缺少对肿瘤细胞的选择性，这是目前 ＣＰＰ在抗 标 。现在已经上市的许多肿瘤靶向治疗药物许多 肿瘤药物治疗应用中的一大障碍，也是相关重组药物 是通过抑制表皮生长因子受体（ＥＧＦＲ）相关活性的发 蛋白在应用中可能产生严重不良反应的重要原因 挥来达到肿瘤治疗的目的，如表皮生长因子受体抗体 ［５］ 类药物、相关酪氨酸激酶抑制剂类药物等。现已发现 之一 。 　　肿瘤靶向型细胞穿膜肽是一类可以选择性靶向结 的表皮生长因子受体的配体有多种，由整个表