茶多酚提取实验.docVIP

蚌埠学院 生物与食品工程系 综合实验 实验名称：茶多酚的提取工艺试验 一、实验目的及要求： 1.了解茶多酚的性质和用途。 2.了解植物天然产物的常规提取及精制方法。 3.通过本实验的具体操作，掌握并熟悉茶多酚的提取与精制的方法及其操作原理和步骤。 4.掌握提取精制过程中茶多酚的分析检测方法。 二、实验原理： 茶多酚是茶叶中多酚类物质的总称，含量约占茶叶干重量的20％－30％。茶多酚可以消除超氧阴离子和过氧化氢自由基，同时具有抑菌、杀菌，有效降低大肠对胆固醇的吸收，增强机体免疫能力等功能。目前，茶多酚被广泛的用作食品、饮料、药品和化妆品的天然添加成分。 （离子沉淀法）茶多酚易溶于热水，与一些金属离子形成络合物，并在一定pH值下溶解度很低。形成的金属离子络合物溶于酸溶液后，茶多酚再次转变成游离状态，再用对茶多酚有更好选择性的溶剂进行萃取、浓缩和干燥，即可得到茶多酚的纯品。 三、实验仪器： 电动搅拌器、离心机、pH试纸、真空干燥箱、抽虑瓶、旋转蒸发仪、真空泵、天平、紫外分光光度计、容量瓶、烧杯、量筒等。 四、实验试剂及材料： 氯化钠、碳酸氢钠、柠檬酸、硫酸铝、盐酸、亚硫酸氢钠、乙酸乙酯、维生素C（抗坏血酸）、磷酸氢二钠、磷酸二氢钾、硫酸亚铁、酒石酸钾钠、硫酸、绿茶等 五、实验内容及步骤： 1．浸提 1.1　预处理:粉碎干茶叶;粉碎的目的是与液体的接触面增大,使提取率增高； 1.2　提取:准确称取经过预处理的干茶叶末10. 00g,按照单因素实验的料液比、浸提温度、浸提时间分别搅拌浸提。过滤（用抽滤的方法）得到茶多酚提取液。用附一的方法测提取液中的茶多酚含量。 单因素实验步骤： 将称取得10.00g茶叶末置于500ml烧杯中，加入200mL蒸馏水，在85℃下，分别提取0.5h、0.75h、1.0h、1.25h、1.5h，测提取液的吸光度，绘制曲线图，找出最佳提取时间。 （2）称取得10.00g茶叶末置于500ml烧杯中，加入200mL蒸馏水，在所测得的最佳提取时间下，分别在75℃、80℃、85℃、90℃、95℃下浸提，测提取液的吸光度，绘制曲线，找出最佳提取温度。 （3）在上述的最佳提取温度，最佳提取时间下，分别用1:10、1:15、1:20、1:25、1:30的料液比浸提，绘制提取液的吸光度曲线，找出最佳料液比。 单因素： ?料液比(g/L)：1:10 1:15 1:20 1:25 1:30 ?浸提温度(℃)：75 80 85 90 95 ?浸提时间(h)：0.5 0.75 1.0 1.25 1.5 取单因素实验的每个因素的最佳范围内的值，做三因素三水平的正交实验。实验结果记录在附五的实验记录表格中。 通过对正交实验进行极差分析后选出最优组合，进行下一步实验。 2．盐析 加氯化钠于茶叶浸提液中，质量分数为2-6％，静置0.5-1.5h后过滤（可用抽滤或者离心的方式）。 3.沉淀 在上述滤液中加入茶叶重量 2％～5％的NaHSO3 ，然后加入茶叶重量 20％的硫酸铝饱和水溶液，加热至 70℃～80 ℃，用 15%NaHCO3 溶液在快速搅拌下调节pH至5～6，此时有大量沉淀析出，沉淀自然沉降一段时间后过滤，最后用等体积70 ℃热水洗涤沉淀三次。 4．酸溶 将沉淀在快速搅拌下放入到一定料酸比体积下的pH＝2.5~4.5的硫酸水溶液中溶解沉淀，控制酸转溶液的pH、酸溶时间，少量胶状沉淀经抽提去除。用附一的方法测酸转溶液中茶多酚的含量 单因素实验步骤： 将上一步骤所得的沉淀放入有40mL、pH=3.0的硫酸水溶的烧杯中，溶解，分别溶解40min、45min、50min、55min、60min，离心除去沉淀，测酸转溶液的吸光度，绘制曲线，找出最佳酸转时间。 取上一步骤所得的沉淀放入有40mL硫酸水溶液的烧杯中，控制硫酸的pH为2.5、3.0、3.、4.0、4.5，在（1）的最佳酸转时间下，溶解，离心去除沉淀，测酸转溶液的吸光度，绘制曲线，找出最佳酸转浓度。 取沉淀置于有20mL、30mL、40mL、50mL、60mL硫酸水溶液的烧杯中，在上述的最佳酸转浓度、最佳酸转时间下，溶解，离心去除沉淀，测酸转溶液的吸光度，绘制曲线，找出最佳酸浓度。 单因素： ?酸浓度（pH）：2.5 3.0 3.5 4.0 4.5 ?料酸比（g/mL）：1:2 1:3 1:4 1:5 1:6 ?酸转时间（min）：40 45 50 55 60 三因素（酸浓度；料酸比；酸转时间） 取单因素实验的每个因素的最佳范围内的值，做三因素三水平的正交实验。实验结果记录在附六的实验记录表格中。 通过对正交实验进行极差分析后选出最优组合，进行下一步实验。 5．萃取 加入茶叶重量2％－5％的NaHSO3至酸转溶