医学微生物实验本科实验三细斯菌致病性及病原性球菌.pptVIP

医学微生物学实验三 主要内容： 上次实验结果观察 细菌生化反应结果分析 细菌的致病作用 病原性球菌形态及培养特性 上次实验结果观察 平板划线分离及菌落观察 菌落形态观察： 菌落的色泽、大小; 表面光滑或粗糙、边缘整齐否; 隆起度、透明度等 不同形态菌落代表不同的细菌 斜面移种法及色素观察 观察细菌在斜面上所形成的菌苔。 绿脓杆菌产生水溶性色素，使整个培养基变绿。 金葡菌产生脂溶性色素，培养基不变色。 细菌生化反应结果分析 H2S产生试验 （史氏痢菌、乙型副伤寒） 细菌生化反应结果分析 葡萄糖发酵试验 乙型副伤寒（产酸产气） 培养基红→黄色，有气泡 史氏痢菌（产酸不产气） 培养基红→黄色，无气泡 细菌生化反应结果分析 吲哚试验 （史氏痢菌、乙型副伤寒） 细菌的致病作用 细菌的毒力物质 1、 侵袭力 菌体结构 侵袭性物质 2、毒 素 内毒素 外毒素 细菌的侵袭力的构成 1、菌体表面结构 荚膜 微荚膜及糖萼 菌毛或非菌毛粘附素 2、侵袭性物质 侵袭性蛋白及侵袭性酶类 细菌所产生的毒素 1、 外毒素： 主要由G+菌产生的能分泌到菌体外的具有毒性的蛋白质。 2、内毒素： G-菌细胞壁脂多糖成份，菌体裂解后释放出。 细菌致病作用的实验内容 肺炎球菌荚膜观察 血浆凝固酶实验 内毒素发热反应 外毒素的毒性作用 肺炎球菌荚膜的观察 荚膜的致病作用 抗吞噬作用 粘附作用 抗有害物质损伤作用 血浆凝固酶 是致病性葡萄球菌产生的一种侵袭性物质 具有抗吞噬作用及血清中杀菌物质对细菌的杀灭作用 使感染局灶化。 血浆凝固酶的种类及检测方法 游离血浆凝固酶 —— 试管法检测 结合血浆凝固酶 —— 玻片法检测 内毒素的发热试验 试验动物 ：家兔 (正常体温范围 38.5-39.5℃) 菌液 ： 加热杀死的伤寒杆菌培养液 结果观察：注射前后体温的变化 注意事项 ：体温计使用 内毒素检测方法——鲎试验 试剂：鲎试剂 内毒素、生理盐水 试验结果观察： 鲎试验(+)：出现凝固 外毒素的毒性作用 实验试剂：破伤风杆菌培养物 破伤风抗毒素 实验动物：小白鼠 试验结果观察： 细菌培养物→小鼠强直性痉挛 病原性球菌 常见病原性球菌的种类 革兰阳性球菌 葡萄球菌 链球菌 肺炎球菌 革兰阴性球菌 淋球菌 脑膜炎球菌 病原性球菌的生物学特点 细菌检测及鉴定常用方法 镜检（ G+球菌） 培养（ G+球菌） 生化反应（ G-杆菌） 血清学诊断 动物实验 核酸诊断等快速诊断 病原性球菌实验内容 病原性球菌的形态观察 葡萄球菌、链球菌、肺炎球菌 病原性球菌的培养特性 普通平板菌落形态的观察 血平板上溶血特性的观察 金黄色葡萄球菌血平板 乙型溶血性链球菌血平板 * * 硫酸亚铁半固体 乙型副伤寒 黑色沉淀物 蛋白胨水 史氏痢菌 吲哚试剂 玫瑰吲哚  ? ? 内毒素与外毒素的比较 强，能刺激机体形成抗毒素， 经甲醛脱毒后能形成类毒素 弱，能刺激机体形成抗体， 但无中和作用。 甲醛处理后不能形成类毒素 抗原性 强、对机体组织器官有选择性， 引起特殊临床表现 弱、各种内毒素作用大致相同，引起休克，发热，DIC等 毒性作用 差、60-80℃ 30min 破坏 好、160℃ 2-4h 破坏 稳定性 蛋白质 脂多糖 化学成分 活菌分泌或细菌溶解散出 细胞壁成分、细菌裂解释出 存在部位 革兰阳性菌部及分革兰阴性菌 革兰阴性菌 来源 外毒素 内毒素 种类 试管法 玻片法 肺炎球菌 G+成双 不完全溶血 胆汁溶菌试验 胞外 、荚膜 链球菌 G+链状 甲链 不完全溶血 条件致病菌 乙链 完全溶血 致病菌 丙链 不溶血 不致病 葡萄球菌 G+葡萄 色素