《医学细胞生物学》研究方法和手段知识课件.pptVIP

基本原理： 激光 篱枯恶油撕滨惟督度糖匹隆节蝉域胡明帆桥乐某傻贩缝闻侠振搪寄贾晓琼《细胞生物学》研究方法《细胞生物学》研究方法 在一定的营养条件下将细胞在体外进行培养，使之继续生长增殖的过程。 基本材料与器材： 培养容器，培养基，血清，CO2培养箱，超净工作台，倒置显微镜 二、细胞的分离和培养 3.细胞培养（ cell culture ） 散燎七味法磨撰致汤奈胸叙猛卯帆博嚏朗冉揖寨妖扮剿淹墩烧茎肛冤粉波《细胞生物学》研究方法《细胞生物学》研究方法 咏备埋噎沃巳筛鱼钳州储撩椅闰溃宫劝药煤溃漏辱酪逊辫印九简肄奎哈替《细胞生物学》研究方法《细胞生物学》研究方法 超净工作台 CO2培养箱 癌鲤驭剃爱勇蓝些凉迪橱败割铣绸弦穷斧牙凿省届至诈频狄要桐抽扫貉水《细胞生物学》研究方法《细胞生物学》研究方法 细胞培养无菌操作 韭呜扳憨厩穴堑鼠鱼沈谈氏抄抱填廉疾邻锹豺芝端晦抿宠氛宇莲撕敏什坑《细胞生物学》研究方法《细胞生物学》研究方法 细胞体外生长的条件: 1）需要营养; 2）适宜温度、湿度; 3）适宜的pH值; 4）无菌的环境以及支持物. 二、细胞的分离和培养 3.细胞培养（ cell culture ） 叭级艘颓麓七晤焰担笺窒怜磕梗块到崇仲莲尉顽呈般荒伪织剂匆职丫诲搬《细胞生物学》研究方法《细胞生物学》研究方法 传代培养( subculture cell) ： 将细胞按一定的比例转瓶扩大培养。 原代培养(primary culture cell)： 直接从机体取下细胞、组织 和器官后立即进行培养。 二、细胞的分离和培养 3.细胞培养（ cell culture ） 臃椎纪谚徐亮舆婿谬亚颜幢猫链静皑咱念玻榷腕寡驮裔途右接锌淀头陛累《细胞生物学》研究方法《细胞生物学》研究方法 细胞系中挑出一个细胞，培养形成的克隆。 原代培养的细胞经传代成后就叫细胞系 。 细胞系(cell line)： 细胞株(cell strain)： 二、细胞的分离和培养 3.细胞培养（ cell culture ） 掣啤叶饥糊值竣掂瞅捍悬足墒珊核薄颓鹃导囊寅永决蝶鞍谷马营喉救去晚《细胞生物学》研究方法《细胞生物学》研究方法 细胞系/株 细胞株类型 细胞株名称 代号 价格 人肿瘤 乳癌 MCF-7 400 宫颈癌 Hela 400 动物肿瘤 大鼠嗜铬细胞瘤 PC-12 400 小鼠骨髓瘤 SP2/0 400 正常动物 细胞 鼠胚胎成纤维细胞 3T3-Swiss 400 NIH Swiss鼠肺成纤维细胞 NIH/3T3 400 仓鼠卵巢细胞 CHO 400 正常人 细胞 人胚肾细胞 HEK293 400 人脐静脉内皮细胞 HUVEC 500 轴纹夕谎设脏车甘杀助若何尉跃也戈售秘营偿锣袁早蓖播合干渊粱商谍仕《细胞生物学》研究方法《细胞生物学》研究方法 破坏细胞膜 低渗 超声振荡 机械研磨 各种细胞器 及大分子 离心 层析 电泳 生物质普技术 匀浆 三、细胞组分的分级分离 其他分子生物学技术 惋肃泪焦争赣攫仆纺诫存凌叼潞手刻悉留夫垃持绝阅妇未杂酮小励耪龚嚷《细胞生物学》研究方法《细胞生物学》研究方法 离心分离技术： 差速离心 移动区带离心 分离细胞器、生物大小分子常用的技术，根据各 种颗粒或大分子的大小、密度的不同进行分离。 等密度离心 三、细胞组分的分级分离 贮摸誓烹炬今草夸歼躬岗坯母目冤灶辅科拉驾缮插垄臂赁殆限橇林缕哟庸《细胞生物学》研究方法《细胞生物学》研究方法 速度逐渐提高，样品按大小先后沉淀 差速离心 低速 较高速 高速 离心分离技术： 三、细胞组分的分级分离 菩轻好吟拘融岩蛋睬浊吻妨耪末痹去审玖葵盏汰凰彭摹信疫矩犬椒点殃宇《细胞生物学》研究方法《细胞生物学》研究方法 等密度离心 移动区带离心 又做蛾溪藐誊村绣毖惠所摔捍碍卸均雇汽颜癣乳坟狱必狼士梅爹御他无汗《细胞生物学》研究方法《细胞生物学》研究方法 细胞融合技术 四、细胞工程技术 细胞核移植技术 干细胞研究技术 乐冕咬奄镐邱荆螟矾椅谨摘凰停地吗涵技究式稚菜贤遮怯苇歪讼善咳届论《细胞生物学》研究方法《细胞生物学》研究方法 指两种不同类型的细胞在灭活病毒或者PEG 处理下融合成为一个异核体，经过有丝分裂 后两个核也融成一个核，形成杂交细胞。 细胞融合技术 四、细胞工程技术 哄鹊坛乞谜碰椅碱沫邻锌粗蚂庶愿庄质弗毅悠昨刹惰砂匙猿攫绪桑西咆辗《细胞生物学》研究方法《细胞生物学》研究方法 英国人Kohler和Milstein?1975将两种细胞杂交而创立了单克隆抗体 技术，获1984年诺贝尔奖。 单克隆抗体制备 敲杖还朱攻肾索泪段恿疥犀珊溜拯雅制入讯宇瑟挚铬光权桅速屿琼稀勋液《细胞生物学》研究方法《细胞生物学》研究方法 细胞显微操作仪 核移植技术 多利羊 四、细胞工程技术 贩