细胞松弛素D、秋水仙素作用下大鼠肝癌细胞中剖析.pdf

细胞松弛素 D、秋水仙素作用下大鼠肝癌细胞中 黏弹性的研究 1 2 3 1,2,3 3 3,4 3,4 5 王为 ，冯全义 ,吴泽志 ,刘彬 ,蔡绍皙 , 徐志玲 ,杨力 ，林才 ， 周婵2 3,4 1,5 6 ，宋国立 , 李校堃 ,付小兵 1 西南大学生命科学学院 重庆 400716 2 重庆大学生物工程学院 重庆 400044 3 重庆大学中美国际合作实验室 重庆 400044 4吉林农业大学教育部生物反应器与药物开发 工程研究中心 长春 130000 5 温州医学院附属第一医院烧伤外科 温州 325000 6 中国人民解放军总医院创伤及细胞生物学实验室 北京 100853 Binliu.china@ 摘 要：采用微管吮吸技术测定了大鼠肝癌细胞的黏弹性，并进一步研究了秋水仙素和细胞松弛素 D 以 及两者混合作用后对于肝癌细胞黏弹性的影响。结果表明：在用 CD 处理癌细胞后发现癌细胞的弹性系数 K1 明显下降。微丝骨架被 CD 抑制后，在加入 Col 后，肝癌细胞的弹性系数 K1 较对照组显著降低。而微 管骨架被 col 抑制后，在加入 CD 后，肝癌细胞的弹性系数 K1 、K2 和 µ 较对照组无明显变化。提示在微管 骨架系统完整存在的情况下，微丝对肝癌细胞的黏弹性系数的的影响起主要作用。而微管骨架系统受到破 坏后，微丝对肝癌细胞黏弹性影响的首要前提是：微丝需借助于微管网络的作用来影响细胞的黏弹性的。 该结论对于揭示癌细胞中骨架系统之间的交互作用对于细胞黏弹性的影响具有一定的意义。 关键词： 肝癌细胞；黏弹性；秋水仙素；细胞松弛素 D 中图分类号：Q6 前言 肝实质细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC ，简称肝癌)的浸润与转移是具有复杂流变 学机制的病理过程，其浸润性生长和穿透内皮细胞是以癌细胞的运动和变形为基础的的[1]。 细胞的黏弹性 （viscoelasticity ）是与细胞的运动和变形有关的重要生物物理特性，因此 研究肝癌细胞的黏弹性并阐明其在肝癌的发生、生长、等转移过程中的作用，是非常必要的。 细胞黏弹性 （viscoelasticity ）是衡量细胞力学特性的一项重要指标，而细胞骨架系统是决定 细胞黏弹性的主要因素。细胞骨架主要包括：微管 （microtubules ），微丝（microfilaments ） 和中间纤维 （intermidiate filaments ）三种。吴泽志张钢等人曾对人肝癌细胞的黏弹性作了大 量的研究[2－3]，采用微管和微丝的抑制剂秋水仙素、长春花碱和细胞松弛素等对细胞骨架 抑制后，来观察细胞的黏弹性变化。进而分析骨架系统在细胞中的作用。从他们的结果可看 - 1 - 出，为管抑制剂秋水仙素的浓度在 20µg/ml 时对微管骨架网络已有明显的抑制作用，而细胞 松弛素 D 在 1µg/ml 时，对微丝网络也有很明显的抑制作用。吴泽志张钢等人研究仅采用的 单一药物来抑制骨架的作用，近些年的研究显示，微管和微丝骨架存在着某中程度关联[4-6] 。 本文以大鼠肝癌细胞作为研究对象，采用微管吮吸技术（Micropipette aspiration technique ） 研究了细胞松弛素 D （cytochalasin D ，CD ）和秋水仙素 （colchicine ，Col ）单独处理以及混 合处理细胞后，对细胞黏弹