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应用微生物技术
背景知识三:消毒与灭菌技术 微生物技术应用 1消毒、灭菌、防腐、化疗有什么不同? 2常规物理消毒灭菌的方法有哪几类?各种方法怎样操作?效果和适用范围是什么? 3 常用的化学消毒灭菌的方法有哪些?适用范围是什么? 4影响消毒灭菌效果的因素有哪些? 5 理解各种方法的原理。 要达到无菌或少菌的要求有很多途径, 控制有害微生物的措施概括如下: (一)灭菌 灭菌:就是采用强烈的理化因素使任何物体内外部的一切微生物永远丧失其生长繁殖能力的措施。灭菌的结果是无菌。 例如高温灭菌、辐射灭菌等。 (二)消毒 消毒:就是消除有害的传染源或致病菌。 (三)防腐/抑菌 利用某种理化因素完全抑制霉腐微生物的生长繁殖,防止食品、生物制品等对象发生霉腐的措施,称为防腐。 ①低温 ②缺氧 ③干燥 ④高渗 ⑤高酸度 ⑥高醇度 ⑦加防腐剂 (四)化疗 化疗即化学治疗,是利用对病原菌具高度毒力而对其宿主基本无毒的化学物质来抑制宿主体内病原微生物的生长繁殖,以达到治疗该宿主所染疾病的方法。 比较项目 灭 菌 消 毒 防 腐 化 疗 处理因素 强理化因素 理、化因素 理、化因素 化学治疗剂 处理对象 任何物体内外 生物体表,酒、乳等 有机质物体内外 宿主体内 微生物类型 一切微生物 有关病原菌 一切微生物 有关病原菌 对微生物作用 彻底杀灭 杀死或抑制 抑制或杀死 抑制或杀死 实例 加压蒸汽灭菌,辐射灭菌,化学杀菌剂 70%酒精消毒,巴氏消毒法 冷藏,干燥,糖渍,盐腌,缺氧,化学防腐剂 抗生素,磺胺药物,生物药物素 二 物理消毒灭菌法 物理灭菌因素的种类很多,主要是高温、辐射、超声波、微波、激光和静高压等。另外,通过稀释、过滤等物理措施也能除菌。 (一)热力灭菌法 在实践中高温是最常用的灭菌方法,具有杀菌效应的温度范围较广。 高温的致死作用,主要是它可引起蛋白质、核酸和脂类等重要生物高分子发生氧化或变性 (一)高温 1. 干热灭菌法 灼烧法 接种环、接种针、试管或三角瓶口等耐热物品,带病原菌的材料、动物尸体 烘箱热空气法 彻底灭菌(包括细菌的芽孢) 150℃~170℃下维持1~2 h 营养体 100℃,维持一小时 实验器具和材料(金属器械、洗净的玻璃或陶瓷器皿、药粉、固定细胞用的载体材料等) 影响高温杀菌效果的主要因素 1.温度: 2.时间: (1)十倍致死时间(D) (2)热死时间。 其他因素 2. 湿热灭菌法 湿热灭菌法是指用100OC以上的加压蒸气进行灭菌。 (1)常压法: ①煮沸消毒法 营养细胞 100℃煮沸15~30分钟 芽孢则 煮沸1~2小时 适用于注射器、解剖用具等的消毒。 ②巴氏消毒法 低温维持法(LTH),62℃下维持30分钟; 高温瞬时法(HTST),72℃下维持15~30秒 用于不适于高温灭菌的食品,如牛乳、酱腌菜类、 果汁、啤酒、果酒和蜂蜜等 ③超高温瞬时灭菌法(UHT)? 营养细胞和芽孢? 135~137℃ 3~5秒 污染严重的鲜乳在142℃以上 用于各种果汁、牛乳、花生乳、酱油等液态食品的杀菌 ④间歇灭菌法/分段灭菌法/丁达尔灭菌法 利用流通蒸汽反复灭菌,温度为100℃,每日一次,加热时间为15至30分钟,连续三次灭菌,每次灭菌后,将灭菌的物品在(28~37℃)培养 适用于不耐热的物品如培养基的灭菌。 (2)加压法: ①高压蒸气灭菌法 103.42KPa的压力,121.1℃处理15~30分钟,或采用较低温度(115℃)下维持30分钟 注意:锅内不应留有空气, 灭菌完毕后应缓慢地放气减压,当压力降到零时才能打开灭菌锅的盖子。 ②连续加压蒸气灭菌法 (二)过滤除菌法 (三) 辐射灭菌法 即利用紫外线、高能电磁波或放射性物质产生的γ射线进行灭菌的方法。 (四) 微波灭菌法 (五)低温 (六)干燥 三 化学消毒灭菌方法 液体消毒剂 表面消毒剂 气体消毒剂 化学因素 防腐剂 抗代谢药物 化学治疗剂 抗生素 生物药物素 化学消毒灭菌是指用
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